1 范围

本标准规定了动物性食品中玉米赤霉醇残留量的酶联免疫吸附测定方法。

本标准适用于猪肉、牛肉、鸡肉、羊肉和牛奶中玉米赤霉醇残留量的筛选检测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验用水规格和试验方法

3 方法提要

鲜奶样品酶解后稀释即可用间接竞争性酶联免疫吸附法进行检测；肉类样品用乙腈提取玉米赤霉醇，萃取净化后，用间接竞争性酶联免疫吸附法进行检测。

4 试剂和材料

除另有要求外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

4.1 乙腈。

4.2 三氯甲烷。

4.3 正己烷。

4.4 葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶。

4.5 玉米赤霉醇酶联免疫试剂盒。

5 仪器和设备

5.1 均质器。

5.2 离心机。

5.3 旋涡混合器。

5.4 酶标仪。

5.5 氮吹仪。

5.6 温育培养箱。

5.7 单道微量加样器：50 uL,100 uL, 20uL～200uL,200 uL～1000 uL。

5.8 多通道微量加样器：50 uL～250 uL可调。

6 样品制备与保存

从全部原始样品取出有代表性样品约200 g，将均质混匀的样品分成两等份，将分好的试样装入洁净容器，加封并做标识，在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。将试样存放于-20℃中保存。

7 样品测定

7.1 鲜奶样品

取1 mL新鲜牛奶到2 mL离心管中，加入8uL葡萄糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶(773 U/mL)，置于37℃水浴酶解2h；取出25uL于另一2 mL离心管中，加入975 uL复溶液进行稀释，混匀；取出50 uL用于分析。

7.2 肉类样品

称取1g(精确至0.1g)样品，加入2 mL去离子水，加入8 uL葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶混匀，37℃水浴酶解2h；取出加入8 mL乙腈，振荡10 min, 3000r/min以上离心5 min；取上清液5 mL，加入2 mL三氯甲烷，加入6 mL正己烷，涡旋振荡10 min, 3000r/min以上离心5 min；去除上层正己烷，取中间层吹干，加入1 mL复溶液旋涡溶解，取200 uL到2 mL离心管中，加入800 uL复溶液混合，取出50 uL用于分析。

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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