目前，油脂及其制品中TBHQ的测定主要有气相色谱法和高压液相色谱法。

气相色谱法

1．测定原理

食用植物油中的叔丁基对苯二酚经80％乙醇提取、浓缩、定容后，用气相色谱仪测定，与标准系列比较定量。

2．仪器

①气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器(FID)。色谱条件如下。

色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长3m，内装涂有2％OV-1固定液的酸洗硅烷化处理的白色硅藻土载体(Chromosorlb WA W DMCS)，80～100目。检测器温度230℃，汽化室温度230℃，柱温180℃。氮气60mL／min，氢气50mL／min，空气500mL／min。

②旋涡混合器、25mL比色管、60mL瓷蒸发皿、2mL或5mL刻度试管。

3．试剂

95％乙醇(分析纯)、无水乙醇(分析纯)、二硫化碳(分析纯)、80％乙醇溶液(取80mL95％乙醇，与15mL水混合)、叔丁基对苯二酚(TBHQ，含量>98.0％)。

叔丁基对苯二酚标准储备溶液：准确称取叔丁基对苯二酚0.10g于50mL烧杯中，用1mL无水乙醇溶解TBHQ晶体后，加入少量二硫化碳混合，混合液倒入100mL棕色容量瓶中。再用1mL无水乙醇洗涤烧杯后，加入少量二硫化碳清洗，清洗液倒人容量瓶中，最后用二硫化碳稀释至100mL。此溶液浓度为1mg／mL，置于4℃冰箱中保存。

4．操作方法

(1)试样处理 准确称取试样2．00g于25mL比色管中，加入5mL 80％乙醇溶液，置旋涡混合器上混合10s(或振摇1min)，静置片刻，放人90℃左右的水浴中加热10～30s促其分层。分层后，将上层澄清提取液用吸管转移到蒸发皿中(勿将油滴带入)。再用5mL80％乙醇溶液重复提取两次，提取液一并加入蒸发皿中。将蒸发皿放在60℃水浴上通风挥发或自然挥发至近干(切勿蒸干)。

在蒸发皿中加入二硫化碳，用小玻棒少量多次洗涤蒸发皿中残留物，转移到2mL容量瓶中，试液作为试样测定液。

(2)制作标准曲线 准确吸取叔丁基对苯二酚(TBHQ)标准储备溶液，用二硫化碳定容，制备成浓度为0、50μg／mL、100μg／mL、150μg／mL、200μg／mL、250μg／mL的标准溶液，用微量注射器依次取不同浓度的标准溶液2μL注入气相色谱仪。以叔丁基对苯二酚(TBHQ)峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

(3)测定 取2μL试样测定液，注入气相色谱仪，试样的叔丁基对苯二酚(TBHQ)蜂面积与标准曲线比较定量。

X1为试样中的叔丁基对苯二酚(TBHQ)含量，g／kg；c为由标准曲线上查出的试样测定液中相当于叔丁基对苯二酚(TBHQ)的浓度，Hg／mL；2为试样提取液的体积，mL；研为试样的质量，g。

计算结果保留两位有效数字。

6．精密度

在重复性条件下两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10％。