微型氧化铝柱(用一次性玻璃滴管装柱)可除去提取液中弱极性的氯代苯、多氯联苯与联三苯和多氯代二苯醚，这些物质被二氯甲烷～正己烷(1：50)首先洗脱出来，留置柱上的PCDDs／PCDFs再用二氯甲烷一正己烷(1：1)洗脱。这种处理还可除去多氯代一2一苯氧基酚(二噁英的一种前体)，以避免其在GC柱上因加热闭环形成PCDDs的干扰。

20世纪80年代中期以来广泛使用双柱法，提取液首先经活性炭吸附，用二氯甲烷洗脱，将平面化合物(包括PCDDs／PCDFs)与非平面化合物分离。用甲苯对活性炭柱反相洗脱平面化合物，再用氧化铝柱将PCDDs／PCDFs与其他平面化合物分离(如非邻位取代的PCBs、多氯代萘)。此法对复杂生物样品的分析十分适用，已有自动化仪器商业供应。近年来也有采用HPLC分离PCDDs／PCDFs的报道，主要用于2，3，7，8一TCDD的定量分析，也用于处理难以净化样品分析其他PCDDs／PCDFs。

提取、净化方法的优劣，应以验证其有效性来确定。通过测定加标样品及基质空白，可获得检测浓度下的回收率。PCDDs／PcDFs分析时至少需要三套标准：一套为17种坨GPC—DDs／PCI)Fs；一套为15种13C-PCDDs／PCDFs的定量内标和2个13C标记的用于确定色谱保留时间的内标，另一套为考察净化效率37CI-2，3，7，8-TCDD标准。

1．分离

净化手段尽管复杂，最终的提取液仍存在氯代化合物的干扰。这就需要良好的分离技术。化学键合固定相的HRGC是有效分离PCDDs／PCDFs的唯一选择。常用WCOT毛细管柱。长度为15～60m，内径0.22～0.35mm，内膜厚度为0.15～0．25μm。非极性或弱极性固定相(烷基／芳基硅烷，如OVl、SE30、SE52、SE54、PS255、DB—l、DB-5、OVl7—01等)可有效地将PCDDs／PCDFs分离为氯原子取代数相同的化合物的组分(如所有TCDDs和TCDFs及所有PCDDs和PCDFs等分离)，而极性固定相(氰基硅烷，如silar-10c、SP2330、SP2340、CP—sil一88等)可将一组中的异构体进行分离。迄今为止，尚未见仅用一根色谱柱即可分离所有同系物异构体的报道。使用非极性色谱柱(如DB一5)分析仅有2，3，7，8一取代的PCDDs／PCDFs，同时使用非极性色谱柱和极性色谱柱(如SP一2331和CP—sil一88)可分离其他位置上氯取代的PCDDs／PCDFs。食品中所要测定的是17种2，3，7，8,取代的PCDDs／PCDFs，仅采用非极性的色谱柱基本可以满足要求。

色谱柱的柱长、内径及涂膜厚度决定了操作条件(温度和载气流速)及被分析物的保留时间。通过对要定量的17种2，3，7，8一{取代的PCDDs／PCDFs同系物异构体(13C标记与未标记)标准品比较获得保留时间。为能准确鉴定被分析组分，校准标准的使用极为必要。应单独测试每个HRGC系统中同系物异构体的色谱出峰次序，因此在仪器分析前需要测试柱效的PCDDs／PCDFs标准进行证实；也可使用含已知同系物异构体成分的样品提取液。

2．定量

要尽量减少化学噪声和改善检出限，以保证PCDDs／PCDFs这一类复杂化合物的痕量分析。采用选择离子监测(SIM)的质谱法，以13C稳定同位素为内标，校正标准测定各个同系物异构体的响应因子和线性范围。定量检测主要采用SIM技术监测氯同位素两个分子离子(M+，M抖)或其他丰度较高的离子，同时监测相应的13C稳定性同位素内标氯同位素的两个分子离子，通过不同窗口对氯不同取代程度的异构体分别定量分析。这可减少共提取物和其他污染物的干扰，提高检测选择性和灵敏度。所使用仪器包括四极杆低分辨质谱仪(LRMS)、双聚焦磁式扇形高分辨质谱仪(HRMS)和质谱一质谱串联(MS-MS)。HRMS通过监测精确质量提供了最高的选择性，因此HRMS是PCDDs／PCDFs测定的首选仪器。电子轰击源为PCDDs／PCDFs分析的常用电离方式(EI)。阴离子化学电离(NCl)对高氯取代化合物有更高的灵敏度，但不适合低氯取代的化合物，如2，3，7，8-TCDD的分析。

MS方法的灵敏度不是由标准溶液的信噪比提供，而是由样品基质条件下的信噪比决定。LRMS在理论上可以达到检测要求的灵敏度，但由于复杂基质和共存的PCBs及其他氯代化合物的干扰，食品中每克PCDDs／PCDFs低于皮克(pg／g)水平的分析的灵敏度和其他技术指标都难以达到分析要求。为了得到分析食物中TCDDs的准确结果，分辨率在10000以上的HRMS成为唯一选择。因为TCDD的M+m／z为319．8963，而干扰物二氯二苯基二氯乙烯的M4+m／z为319．9321，需要分辨率为9000的HRMS。双聚焦磁式扇形HRMS不仅提高了仪器的分辨率，而且提高了信噪比，这意味着化学噪声的降低。灵敏度的提高，同时检测多个离子质量的能力较强，进行SIM时m／z可长时间不发生漂移，进一步改进信噪比，提供极高的灵敏度，最小检出限可达10fg，更适合于PCDDs／PCDFs分析要求，为多数二噁英分析实验室采用。

基于HRMS的技术优势，采用同位素稀释法，利用HRGC-HRMS检测PCDDs／PCDFs的关键点为：,用13C同位素内标与样品预处理同时进行，监测样品制备的回收率、同位素稀释的准确度和GC—MS方法的确认。采用标准考察异构体的GC分离和MS的定性、定量的分析质量控制，严格控制硅胶、硅镁吸附剂、氧化铝、活性炭等的洗提回收。HRMS的分辨率要求在10000以上，保证SIM的灵敏度和稳定性，采用HRGC分离。质量控制措施包括：系统空白、回收试验、线性范围、各化合物的保留值窗口、氯取代的同位素峰簇比值、异构体的GC分离、质谱分辨率、信噪比、盲样核对以及用三个离子定性等。对所有被检测的离子，确定PCDDs／PCDFs的存在必须要求其信噪比大于3:1，且分子的面积比和标准的离子碎片的偏差应在10％以内，由内标物得到的数据与标准物的偏差应在10％以内，标准物与内标的离子谱图应一致。

串联质谱是另外一种可供选择的方案。在离子源中形成的离子被第一个质量分析器分离，然后选择某些离子进行碰撞裂解，再由第二个质量分析器检测裂解离子。如果第一个质量分析器为扇形HRMS，设定分离PCDDs／PCDFs的M+碎片；第二个质量分析器为四极杆LRMS，分离M+-COCl特征碎片，这样仪器的选择性进一步提高，可不通过GC分离直接进样，快速测定TCDD。但这一方法只能测定同系物，不能分离异构体。因此HRGC-MS—MS就成为测定17种2，3，7，8一取代PCDDs／PCDFs的要求，而这一仪器与HRGC—HRMS的购买和维护费用相当，灵敏度是其1／6，HRGC—HRMS就成为第一选择。

最近美国食品与药物管理局(FDA)研究了利用较便宜的四极杆离子储存时间串联质谱(QISTMS)分析方法。采用这一方法可以检测食品中TEQs低于lpg／g水平的2，3，7，8一取代的PCDDs／PCDFs(TCDD为0．2pg／g)，分析了包括奶、羊脂、蛋、牛肉、鱼和油脂在内的200份样品。测定受污染样品鸡蛋和鲇鱼的结果与HRMS具可比性。FDA正对这一分析方法进一步改进，以期可达HRMS检测限，来替代HRMS进行食品中PCDDs／PCDFs含量的日常监督。

3．结果报告

测定17种2，3，7，8一取代的PCDDs／PCDFs含量后，每个同系物异构体的浓度乘以相应的TEF，然后将结果相加，报告的结果就是毒性当量(TEQs)。结果报告时应根据相应的脂肪含量折算成以脂肪计的TEQs。