A.1 一般规定

本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682—2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验

A.2.1 试剂和材料

A.2.1.1 盐酸溶液：取盐酸1mL,用水稀释至3mL。

A.2.1.2 氢氧化钠溶液：取氢氧化钠1g,加水溶解并稀释至25mL。

A.2.2 鉴别方法

称取约1.5mg试样，加100mL水溶解，此为试样液。试样液在透射光下显淡黄绿色，并有强烈的黄绿色荧光。取试样液25mL,加入0.5mL盐酸溶液，荧光消失；另取试样液25mL,加入0.1mL氢氧化钠溶液，荧光消失。

A.3 核黄素(C₁₇H₂ON₄O₆)含量的测定

A.3.1 试剂和材料

A.3.1.1 冰乙酸。

A.3.1.2 乙酸钠溶液：14g/L。

A.3.2 仪器和设备

分光光度计。

A.3.3 分析步骤

避光操作。称取约100mg样品，精确至0.0001g,置于500mL容量瓶中，加1mL冰乙酸和75mL水。待样品溶解后，用水稀释至刻度，摇匀。精确量取10mL,置于100mL容量瓶中,加入7mL乙酸钠溶液，用水稀释至刻度，摇匀。以水作空白，用光程为1cm的比色杯，在444nm波长处测定样品溶液的吸光度。核黄素的吸光系数(-----359.1---)以328计。

A.3.4 结果计算

核黄素含量以核黄素的质量分数W0计，数值以％表示，按公式(A.1)计算：

式中：

50—稀释倍数；

A—样品溶液的吸光度值：

m—样品质量的数值，单位为克(g);

W1—实测样品干燥减量的数值，%。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与算术平均值的比值不大于1.0%。

A.4 比旋光度的测定

A.4.1 试剂和材料

盐酸溶液：取盐酸27.0mL,用水稀释、定容至50mL。

A.4.2 仪器和设备

旋光仪，精度±0.01°。

A.4.3 分析步骤

避光操作。称取0.75g(以无水品计)样品，精确至0.0001g,置于50mL容量瓶中，加盐酸溶液溶解并稀释至刻度，在15min内、25℃±1℃条件下用旋光仪测定比旋光度。

A.4.4 结果计算

比旋光度αm(25℃,D)数值(o)·dm²·kg^-1表示，按公式(A.2)计算：

式中：

a—测得的旋光角，单位为度(o);

l—旋光管的长度，单位为分米(dm)；

Pa—样品溶液的浓度，单位为克每毫升(g/mL)。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与算术平均值的比值不大于1.0%。

A.5 PH的测定

A.5.1 仪器和设备

酸度计，精度±0.01。

A.5.2 分析步骤

称取1.0g样品，精确至0.0001g,置于200mL清洁干燥的烧杯中，加水100mL溶解，在20℃下用酸度计测定其pH。

A.5.3 结果计算

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与算术平均值的比值不大于1.0%。

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文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(二)》

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