A.4 总黄酮的测定

A.4.1 方法提要

黄酮类化合物分子结构中具有C₃、C₅位羟基或邻苯二羟基时可与铝盐等金属盐试剂生成有色络合物，在波长510nm处有最大吸收值。

A.4.2 试剂和材料

A.4.2.1 芦丁标准品。

A.4.2.2 乙醇：30%。

A.4.2.3 乙醇：60%。

A.4.2.4 硝酸铝：10%。

A.4.2.5 氢氧化钠：1mol/L。

A.4.2.6 亚硝酸钠：5%。

A.4.3 分析步骤

标准液的制备：称取芦丁标准品20mg(精确到0.1mg)，以60%乙醇溶解于100mL容量瓶中，并稀释至刻度。取此样液20mL于50mL容量瓶中，加60%乙醇溶液5mL，以水稀释至刻度，即得标准液(1mL标准液约含0.08mg芦丁标准品)。

试样液的制备：称取试样约20mg(精确到0.1mg)，以60%乙醇25mL热溶于50mL容量瓶中，冷却，以蒸馏水稀释至刻度，即得试样液。

分别取上述两液各5mL于10mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀，静置6min，加10%硝酸铝溶液0.3mL，摇匀，静置6min，加入1mol/L氢氧化钠溶液4mL，摇匀，用30%乙醇定容，静置15min，用1cm比色，在波长510nm处测吸光度。

A.4.4 结果计算

总黄酮的质量分数w₂，按式(A.2)计算

式中：

0.04——标准品中黄酮含量，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

A₁——试样的吸光度；

A₂——标准品的吸光度；

m₂——试样的质量，单位为毫克(mg)；

K——试样的稀释倍数。

试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.2%。

A.5 干燥失重的测定

A.5.1 分析步骤

准确称取试样2g(精确至0.0002g)，置于烘箱中，在110℃±1℃烘至恒重。

A.5.2 结果计算

干燥失重的质量分数w₃，按式(A.3)计算：

式中：

m₃——烘干前称量瓶和试样的质量，单位为克(g)；

m₄——烘干后称量瓶和试样的质量，单位为克(g)；

m₅——试样的质量，单位为克(g)。

试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.1%。

A.6 AOM值(添加量0.02%)的测定

A.6.1 方法提要

AOM值是指在严格控制的测试条件下，向油样中充气，使过氧化值达到100(以毫克当量碘/千克油样计)时所需要的时间，作为油脂试样阻滞自动氧化的指数。

A.6.2 仪器和设备

AOM值测定仪。

A.6.3 分析步骤

把置有20mL精制猪油(猪油中添加0.02%抗氧物)的试管顺圆形恒温槽的圆周排列起来，启动搅拌器和电恒温调节器，以便保持恒温，每隔一定时间取出油样，测定其过氧化物价，待测得过氧化物价达100mg I2/kg所需要的时间(h)，即为精制猪油阻滞自动氧化的指标。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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