１ 主要内容与适用范围
本标准规定了水果、蔬菜、谷类中敌敌畏、速灭磷、久效磷、甲拌磷、巴胺磷、二嗪农、乙嘧硫磷、甲基嘧啶硫磷、甲基对硫磷、稻瘟净、水胺硫磷、氧化喹硫磷、稻丰散、甲喹硫磷、克线磷、乙硫磷、乐果、喹硫磷、对硫磷、杀螟硫磷的残留量分析方法。
本标准适用于使用过敌敌畏等二十种农药制剂的水果、蔬菜、谷类等作物的残分析。
２ 原理
含有机磷的样品在富氢焰上燃烧，以 HPO 碎片的形式，放射出波长５２６nm?的特性光；这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。样品的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。
３ 试剂
３．１ 丙酮
３．２ 二氯甲烷
３．３ 氯化钠
３．４ 无水硫酸钠
３．５ 助滤剂 Celite ５４５
３．６ 农药标准品
３．６．１ 敌敌畏（ＤＤＶＰ）：９９％。
３．６．２ 速灭畏（mevinphos）：顺式６０％，反式４０％。
３．６．３ 久效磷（monocrotophos）：９９％。
３．６．４ 甲拌磷（phorate）：９８％。
３．６．５ 巴胺磷（propetumphos）：９９％。
３．６．６ 二嗪农（diazinon）：９８％。
３．６．７ 乙嘧硫磷（etrimfos）：９７％。
３．６．８ 甲基嘧啶硫磷（paratehion-methyl）：９９％。
３．６．９ 甲基对硫磷（Parethion-methyl）：９９％。
３．６．１０ 稻瘟净（Kitazine）：９９％。
３．６．１１ 甲基嘧啶硫磷（paratehion-methyl）：９９％。
３．６．１２ 氧化喹硫磷（po-quinalphos）：９９％。
３．６．１３ 稻丰散（phenthoate）：９９．６％。
３．６．１４ 甲喹硫磷（methdathion）：９９．６％。
３．６．１５ 克线磷（phenamiphos）：９９．９％。
３．６．１６ 乙硫磷（ethion）：９５％。
３．６．１７ 乐果（dimethoate）：９９．０％。
３．６．１８ 喹硫磷（quinaphos）：９８．２％。
３．６．１９ 对硫磷（parathion）：９９．０％。
３．６．２０ 杀螟硫磷（fenitrothion）：９８．５％。
３．７ 农药标准溶液的配制：分别准确称取３．６．１至3.6.20标准品，用二氯甲烷为溶剂，分别配制成１．０ｍｇ／ｍＬ的标准储备液，贮于冰箱（４℃）中，使用时用二氯甲烷稀释配成单一品种的标准使用液（１．０µｇ／ｍＬ）。再根据各农药品种的食品相应值或最小检测限，吸取不同量的标准储备液，用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。
４ 仪器
４．１ 组织捣碎机。
４．２ 粉碎机。
４．３ 旋转蒸发仪。
４．４ 气相色谱仪：附有火焰光度检测器（ＦＰＤ）。
５ 试样的制备
取粮食样品经粉碎机粉碎，过２０目筛制成粮食试样；取水果、蔬菜样品洗净、晾干、去掉非可食部分后制成待分析试样。
６ 分析步骤
６．１ 提取
６．１．１ 水果、蔬菜
称取50.00g试样，置于 300mL烧杯中，加入50mL水和 100mL丙酮（提取液总体积为150mL)，用组织捣碎机提取1-2 min。 匀浆液经铺有二层滤纸和约10g Celite 545的布氏漏斗减压抽滤。从滤液中分取 100mL移至 500mL分液漏斗中。
６．１．２ 谷物
称取２５．００ｇ试样，置于３００ｍＬ烧杯中，加入５０ｍＬ水和１００ｍＬ丙酮，以下步骤同６．１．１。
６．２ 净化
向６．１．１或６．１．２的滤液中加入１０－１５ｇ氯化钠使溶液处于饱和状态。猛烈振摇 2--3min，静置 10min，使丙酮从水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇２ｍｉｎ，再静置分层。
将丙酮与二氯甲烷提取液合并经装有２０－３０ｇ无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水滤入２５０ｍＬ圆底烧瓶中，再以约４０ｍＬ二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠。洗涤液也并入烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至约２ｍＬ，浓缩液定量转移至５～２５ｍＬ容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度。
６．３ 气相色谱测定
６．３．１ 色谱参考条件
６．３．１．１ 色谱柱
(1) 玻璃柱2.6m×3mm(i．d)，填装涂有4.5％(m/m)ＤＣ－200＋2.5％（ｍ／ｍ）ＯＶ－１７的 Chromosorbw Ｗ Ａ Ｗ ＤＭＣＳ（８０－１００ 目）的担体。
(2).玻璃柱2.6m×3mm(i.d), 填装涂有1.5％(m/m) ＤＣＯＥ－１ 的 Chnomosorb
Ｗ Ａ Ｗ ＤＭＣＳ(60－80目)。
６．３．１．２ 气体速度Ｎ2 50mL/min、Ｈ2 100mL/min、空气 50mL/min.
６．３．１．３ 温度：柱箱２４０℃、汽化室２６０℃、检测器２７０℃。
６．４ 测定
吸取２－５?Ｌ混合标准液及样品净化液注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。
７ 计算
Ｘi = (Ａｉ×Ｖ1×Ｖ3×Ｅsi ×1000)/(Ａsi×Ｖ2×Ｖ4×ｍ×1000)
式中：Ｘi —ｉ组分有机磷农药的含量，ｍｇ／ｋｇ。
Ａi —试样中ｉ组分的峰面积，积分单位；
Ａsi—混合标准液中ｉ组分的峰面积，积分单位；
Ｖ1 —试样提取液的总体积，ｍＬ。
Ｖ2 —净化用提取液的总体积，ｍＬ。
Ｖ3 —浓缩后的定容体积，ｍＬ。
Ｖ4 —进样体积，ｍＬ。
Ｅsi—注入色谱仪中的ｉ标准组分的质量，ｎｇ；
ｍ —样品的质量，ｇ。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数。
８ 允许值: 相对相差 ≤ １５％ 。
９ 其它
９．１ 十六种有机磷农药的色谱图：
见附图
９．２ １３种有机磷农药的色谱图
见附图
第二篇 粮、菜、油中有机磷农药残留量测定方法
10 主题内容与适用范围
本标准规定了粮、菜、油等食品中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷的测定方法。
本标准适用于粮、菜、油使用过敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌磷、稻瘟净、杀螟硫磷、倍硫磷、虫螨磷等的农中药的残留量分析。
最低检出量为0.1￣0.3ng，进样量相当０．０１ｇ样品, 最低检出浓度范围０．０１--０．０３ｍｇ／ｋｇ。
１１ 原理
样品中有机磷农药经提取，分离净化后在富氢焰上燃烧，以ＨＰＯ碎片的形式，放射出波长５２６ｎｍ光，这种特征光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号，经微电流放大器放大后，被记录下来。样品的峰高与标准的峰高相比，计算出样品相当的含量。
１２ 试剂
１２．１ 二氯甲烷。
１２．２ 无水硫酸钠。
１２．３ 丙酮。
１２．４ 中性氧化铝：层析用，经３００℃活化４ｈ后备用。
１２．５ 活性炭：称取２０ｇ活性炭用盐酸(３ｍｏｌ／Ｌ)浸泡过夜，抽滤后，用水洗至无氯离子，在１２０℃烘干备用。
１２．６ 硫酸钠溶液(５０ｇ／Ｌ)。
１２．７ 农药标准溶液：准确称取适量有机磷农药标准品，用苯（或三氯甲烷）先配制贮备液，放在冰箱中保存。
１２．８ 农药标准使用液：临用时用二氯甲烷稀释为使用液，使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷和甲拌磷每毫升各相当于１．０?ｇ，稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷和虫螨磷每毫升各相当于２．０?ｇ。
１３ 仪器。
１３．１ 气相色谱仪：具有火焰光度检测器。
１３．２ 电动振荡器。
１４ 分析步骤
１４．１ 提取与净化
１４．１．１ 蔬菜：
将蔬菜切碎混匀。称取１０．００ｇ混匀的样品，置于250 mL具塞锥形瓶中，加３０～１００ｇ无水硫酸钠（根据蔬菜含水量）脱水，剧烈振摇后如有固体硫酸钠存在，说明所加无水硫酸钠已够。加０．２～０．８ｇ活性碳（根据蔬菜色素含量）脱色。加７０ｍＬ二氯甲烷，在振荡器上振摇０．５ｈ，经滤纸过滤。量取３５ｍＬ滤液，在通风柜中室温下自然挥至近干，用二氯甲烷少量多次研洗残渣，移入１０ｍＬ（或５ｍＬ）具塞刻度试管中，并定容至２．０ｍＬ，备用。
１４．１．２ 稻谷：
脱壳、磨粉、过２０目筛、混匀。称取１０．００ｇ，置于具塞锥形瓶中，加入０．５ｇ中性氧化铝，及２０ｍＬ二氯甲烷，振摇０．５ｈ，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，则加30ｍＬ二氯甲烷，振摇过滤，量取１５ｍＬ滤液浓缩并定容至２．０ｍＬ进样。
１４．１．３ 小麦、玉米：
将样品磨碎过２０目筛、混匀。称取10.00g置于具塞锥形瓶中，加入０．５ｇ中性氧化铝、０．２ｇ活性碳及２０ｍＬ二氯甲烷，振摇0.5h，过滤，滤液直接进样。如农药残留量过低，则加３０ｍＬ二氯甲烷，振摇过滤，量取１５ｍＬ滤液浓缩，并定容至２ｍＬ进样。
１４．１．４ 植物油：
称取５．０ｇ混匀的样品，用５０ｍＬ丙酮分次溶解并洗入分液漏斗中，摇匀后，加10mL水，轻轻旋转振摇１ｍｉｎ，静置１ｈ以上，弃去下面析出的油层，上层溶液自分液漏斗上口倾入另一分液漏斗中，当心尽量不使剩余的油滴倒入（如乳化严重，分层不清，则放入５０ｍＬ离心管中，以２５００ｒ／ｍｉｎ离心０．５ｈ，用滴管吸出上层溶液）。加３０ｍＬ二氯甲烷，１００ｍＬ硫酸钠溶液(５０ｇ／Ｌ)，振摇１min。 静置分层后，将二氯甲烷提取液移至蒸发皿中。丙酮水溶液再用 10 mL二氯甲烷提取一次，分层后，合并至蒸发皿中。自然挥发后，如无水，可用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿中残液移入具塞量筒中，并定容至５ｍＬ。加２ｇ无水硫酸钠振摇脱水，再加１ｇ中性氧化铝、０．２ｇ活性炭（毛油可加0.5g）振摇脱油和脱色，过滤，滤液直接进样。二氯甲烷提取液自然挥发后如有少量水，可用５ｍＬ二氯甲烷分次将挥发后的残液洗入小分液漏斗内，提取１ｍｉｎ，静置分层后将二氯甲烷层分入具塞量筒内，再以５mL二氯甲烷提取一次，合并入具塞量筒内，定容至１０ｍＬ，加５ｇ无水硫酸钠，振摇脱水，再加１ｇ中性氧化铝、０．２ｇ活性炭，振摇脱油和脱色，过滤，滤液直接进样。或将二氯甲烷和水一起倒入具塞量筒中，用二氯甲烷少量多次研洗蒸发皿，洗液并入具塞量筒中，以二氯甲烷层为准定容至５ｍＬ，加３ｇ无水硫酸钠，然后如上加中性氧化铝和活性炭依法操作。
１４．２．１ 色谱柱：玻璃柱，内径３ｍｍ，长１．５～２．０ｍ。
１４．２．１．１ 分离测定敌敌畏、乐果。马拉硫磷和对硫磷的色谱柱，①内装涂以２．５％（ｍ／ｍ）ＳＥ－３０和３％（ｍ／ｍ）ＱＦ－１混合固定液的６０－８０目 Chromosorb Ｗ ＡＷ ＤＭＣＳ。② 内装涂以1.5％ (m/m) ＯＶ－１７和２％（ｍ／ｍ）ＱＦ－１混合固定液的６０－８０目chromosorb W AW DMCS。③ 或内装涂以２％（ｍ／ｍ）OV-101和 2％ (m/m) ＱＦ－１ 混合固定液的６０－８０目Chromosorb Ｗ ＡＷ ＤＭＣＳ。
１４．２．１．２ 分离、
测定甲拌磷、虫螨磷、稻瘟净、倍硫磷和杀螟硫磷的色谱柱。④内装涂以３％（ｍ／ｍ）ＰＥＧＡ和 ５％ （ｍ／ｍ）ＱＦ－１混合固定液的６０～８０目Chromosorb Ｗ ＡＷ ＤＭＣＳ。⑤ 内装涂以２％(m/m) ＮＰＧＡ和３％(m/m) ＱＦ－１混合固定液的60～80目Chromosorb Ｗ ＡＷ ＤＭＣＳ。
１４．２．２ 气流速度：
载气为氮气８０ｍＬ／ｍｉｎ；空气５０ ｍＬ／ｍｉｎ ；
氢气１８０ｍＬ／ｍｉｎ（氮气、空气和氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件）。
１４．２．３ 温度：进样口: ２２０℃；检测器: ２４０℃；柱温: １８０℃，但测定敌敌畏为１３０℃。
１５ 测定
将１２．８所述的混合农药标准使用液２～５µＬ分别注入气相色谱仪中，可测得不同浓度有机磷标准溶液的峰高。分别绘制有机磷标准曲线。同时取样品溶液２～５µＬ注入气相色谱仪中，测得的峰高从标准曲线图中查出相应的含量。
１６ 计算
Ｘ1 = Ａ1× 1000/ｍ1×１０００×１０００
式中：Ｘ1 —样品中有机磷农药的含量，ｍｇ／ｋｇ；
Ａ1 —进样体积中有机磷农药的质量，ｎｇ；
ｍ —进样体积（?Ｌ）相当于样品的质量，ｇ。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
１７ 允许差：敌敌畏、甲拌磷、倍硫磷、杀螟硫磷相对相差 ≤ 10% 。
乐果、马拉硫磷、对硫磷、稻瘟净相对相差 ≤ １５％ 。
１８ 其它
气相色谱图
见附图
第三篇 肉类、鱼类中有机磷农药残留量的测定方法
１９ 主题内容与适用范围:
本标准规定了肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷的残留分析方法。
本标准适用于肉类、鱼类中敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷农药的残留分析。敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷最低检出量为0.6、0.3、0.3、0.15ng,当进样量相当 0.002g 时最低检出浓度分别为0.03、0.015、0.015、0.008 mg／kg。
２０ 原理: 同２。
２１ 试剂
２１．１ 丙酮。
２１．２ 二氯甲烷。
２１．３ 无水硫酸钠：在７００℃灼烧４ｈ后备用。
２１．４ 中性氧化铝：在５５０℃灼烧４ｈ。
２１．５ 硫酸钠溶液(20g/L)。
２１．６ 农药标准溶液：准确称取敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷标准品各10.0mg，
用丙酮溶解并定容至１００ｍＬ，混匀，每毫升相当农药０．１０ｍｇ，作为贮备液，保存于冰箱中。
２１．７ 农药标准使用液：临用时用丙酮稀释至每毫升相当２．０µｇ。
２２ 仪器
２２．１ 气相色谱：附ＦＰＤ检测器
２２．２ 电动振摇器
２３ 分析步骤
２３．１ 提取净化：将有代表性的肉、鱼样品切碎混匀，称取２０．００ｇ于２５０ｍＬ具塞锥瓶中，加60mL丙酮，于振荡器上振摇0.5h，经滤纸过滤，取滤液３０ｍＬ于１２５ｍＬ分液漏斗中，加６０ｍL硫酸钠溶液(２０ｇ／Ｌ) 和30ｍＬ二氯甲烷，振摇提取2min后，静置分层，将下层提取液放入另一个１２５ｍＬ分液漏斗中，再用２０ｍＬ二氯甲烷于丙酮水溶液中同样提取后，合并二次提取液，在二氯甲烷提取液中加１ｇ中性氧化铝（如为鱼肉加５．５ｇ）轻摇数次，加２０ｇ无水硫酸钠。振摇脱水，过滤于蒸发皿中，用２０ｍＬ二氯甲烷分二次洗涤分液漏斗，倒入蒸发皿中，在５５℃水浴上蒸发浓缩至１ｍＬ左右，用丙酮少量多次将残液洗入具塞刻度小试管中，定容至2－5mL，如溶液含少量水，可在蒸发皿中加少量无水硫酸钠后，再用丙酮洗入具塞刻度小试管中，定容。
２３．２ 色谱条件
２３．２．1 色谱柱 内径 3.2mm长1.6m玻璃柱，内装涂以ＯＶ－１７(1.5% m/m)
和ＱＦ－１(2% m/m)的混合固定液的80－100目Chromosorb Ｗ Ａ Ｗ ＤＭＣＳ。
２３．２．2 流量：氮气 60mL/min； 氢气 0.7kg/ｃｍ2；空气 0.5kg/ｃｍ2。
２３．２．3 温度：检测器２５０℃，进样口２５０℃；柱温２２０℃（测定敌敌
畏时为１９０℃）。如同时测定四种农药可用程序升温。
２３．２．4 色谱图
见附图
２３．３ 测定
将标准使用液或样品液进样１￣３?Ｌ，以保留时间定性；测量峰高，与标准比
较进行定量。
２４ 计算
Ｘ2 = Ａ2× 1000/ｍ2
式中：Ｘ2 —样品中有机磷农药的质量，ｍｇ／ｋｇ；
Ａ2 —进样体积中有机磷农药的量，ｍｇ；
ｍ2 —进样体积相当于样品的质量，ｇ；
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数值。
２５ 允许差 : 相对相差 ≤１０％ 。
附加说明：
本标准由中华人民共和国卫生卫生监督司提出
本标准第一篇由中国农业科学院分析测试中心、南京农业大学、卫生部食品卫
生监督检验所负责起草
第二篇由卫生部食品卫生监督检验所、上海市卫生防疫站、北京市卫生
防疫站负责起草
第三篇由江苏省卫生防疫站负责起草。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 |