如果去除内源性O-GlcNA。的酶被抑制，则细胞内总的O-Glc-NAc水平将升高，而使O-G1cNAc的检测几率提高。PUGNAc [O-(2-acetamido-2-deoxy-D-glucopyranosylidene）-amino-N-phenyl - carbamate]是O-连接N-乙酰半乳糖昔酶的有效抑制剂，并且无明显细胞毒性。

(1）材料：PUGNAc（Carbogen, Switzerland）贮液，20mmol/L溶于超纯水。

(2）方法：

1) l00mm培养皿接种单层细胞。

2）更换新鲜培养基（含40-100Um PUGNAc)。

3）培养箱中培养6-18小时。

4）提取目的蛋白（如核蛋白，胞质蛋白或者总蛋白）。

5）检测O-G1cNAc水平。