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离子色谱法测定中草药成分的研究

发布时间:2016-03-16 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:378

中草药的化学成分复杂,主要含有氨基酸、蛋白质、糖类、有机酸及无机微量元素等。中草药的药效是各个化学成分协同作用的结果,所以对中草药中阴离子、有机酸和水溶性单糖的研究具有重要意义。离子色谱法是快速、灵敏而准确地同时分析测定多种无机阴离子的首选方法。鉴于糖类分子具有电化学活泼性和在强碱溶液中呈离子化状态,高效阴离子交换色谱一脉冲安培检测(HPAEC-PAD)法是近年发展的分析糖类的方法,这种方法不需要对样品衍生化处理即可直接分析单糖,操作方便、灵敏度高、不使用有毒化学试剂,对糖类的检出限可以达到pmol数量级。单糖对固定相的亲和力差别并不大,但将流动相的pH降低至靠近相应单糖的pK值时,只要它们的离解常数有差异就可以将其分开。因此,运用超声萃取技术,在线渗析进样,方便、高效地提取了中草药中的阴离子、有机酸和水溶性单糖,研究了电导抑制检测F-、Cl-、Br、NO2-、NO3、PO3-4、SO2-4和草酸、苹果酸、富马酸的方法,以及脉冲安培检测阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和果糖的方法,为医药界研究中草药成分含量提供了一种快速的分析手段。

1.色谱条件

(1)阴离子和有机酸分离条件

离柱:MetrosepASupp4250(250mm×4mm),MetrosepASupp4/5Guard保护柱(50mm×4mm);淋洗液:1.8mmol/LNaCO3+1.7mmo1/LNaHCO3+2%丙酮;再生液:50mmol/LH2SO4;进样体积:20μL;流速:0.8mL/min。

(2)单糖分离条件

分离柱:METROSEPCARP1(150mm×0.4mm)阴离子交换柱;淋洗液:l0mmol/LNaOH溶液;流速:1.0mL/min;进样量:20μL;柱温:32℃。

2.样品处理

采用超声辅助水提取的方法,将中草药在60℃烘箱中干燥6h,粉碎过60目筛,准确称取0.20g,置于烧杯中,加入超纯水20mL,超声提取30min,放置室温,定容至25mL,用0.45μm微孔滤膜过滤后渗析进样。

3.样品分析

在优化的分离测定条件下,分析10种无机阴离子和有机酸的标准溶液和麻黄样品,以峰面积一浓度分别绘制各组分的标准曲线,其分离情况见图7-43和图7-44,分析5种单糖的标准溶液和黄蔑样品,峰高定量,其分离情况见图7-45和图7-46。

4.结果讨论

研究建立并优化了高效、简便的阴离子交换色谱分析中草药中的无机阴离子、有机酸和糖类化合物的方法。该方法灵敏度高、准确性好、操作简单、适用性强、具有一定的实用价值,可以为医药界研究中草药成分含量提供一种快速的分析手段。

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