(1)原理本法也是假定在通常重要条件下，微生物在普通营养琼脂培养基中生长，每一个活菌都可以长出一个肉眼可见的菌落，计数菌落就可以了解食品中微生物污染情况而设计的。

(2）检验程序如图3-5所示。

(3）检验步骤

①样品处理：同AOAC 990.12.

②培养：选择2-3个适宜的连续稀释度的样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内，每个稀释度加两个平皿，然后加人冷却至42一45℃的菌落计数琼脂，每皿15一20mL，要求从开始稀释到加入菌落计数琼脂中间的时间不要超过10min。待琼脂凝固后，将平板翻转，(35±1) 0C培养（48±2)h。

 ③菌落计数：选取菌落数在30一3000FU、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于3000FU的稀释后再计数。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。

3.2.5 GB, ISO和AOAC三个标准菌落总数测定方法比较

根据中国合格评定国家认可委员会认可证书（注册号：CNAS L0604)推荐和我国现行国家检验标准，选择GB 4789.2-2010, ISO 4833: 2013, AOAC 966.23比较三种菌落总数测定的方法的异同。结果如表3-1。

表3-1 GB, ISO, AOAC中细菌总数（TPC）的检测