北京普天同创生物科技有限公司
一、实验原理
维生素C(vitaminC, ascorbicacid)是维持人体正常生理功能的必需化合物,对缺铁性贫血、坏血病、动脉硬化等疾病有预防和治疗作用。每人每天应摄取50 100 mg的维生素C,如果摄取超过此范围,身体也无法多吸收,等于浪费;如果低于30 mg,身体就会缺乏维生素C,使部分机能无法正常运作,长期下来,甚至出现坏血症,甚至危及生命。人体所需的维生素C主要由蔬菜水果提供,测定蔬菜水果中维生素C含量对评价人群维生素C摄入量有重要意义。
维生素C具有很强的还原性,能将碘还原成碘离子。碘遇淀粉变蓝色,而碘离子不能使淀粉溶液改变颜色;因此,在含有维生素C的溶液中,加入淀粉溶液,就可以用碘溶液来滴定被检测样品中的维生素C。记录滴定用去的碘溶液量,再根据已知的每毫升碘溶液可以与多少毫克的维生素C发生反应,就可以计算出被检测样品的维生素C含量。由于维生素C的还原性很强,在空气中易被氧化,特别是在碱性介质中更易被氧化,故在测定时须加入少量稀醋酸或盐酸使溶液呈弱酸性,以减少副反应的发生。
二、主要仪器和药品
容量瓶(250 ml)、酸式滴定管(50 ml)、锥形瓶、量筒、玻璃棒、尼龙滤布、天平、多功能食物粉碎机、漏斗、pH试纸、烧杯。
碘溶液(0.02 mo1·L-1)、盐酸(质量分数为2%)或醋酸(2 mol·L-1)、可溶性淀粉溶液(质量分数为2%)、蒸馏水、维生素C(分析纯)。
新鲜的水果或蔬菜(西红柿、苹果、柑橘等)、蔬果罐头、果汁饮料等。
三、实验内部及步骤
1.制备果蔬组织提取液
①准确称取50 g水果或蔬菜,放入多功能食物粉碎机中,再加入50 ml蒸馏水进行粉碎并转移至200 ml容量管中,用少量蒸馏水多次清洗粉碎机,清洗液合并于容量管中并定容。
②在干漏斗中垫上尼龙滤布,将粉碎后的果蔬液过滤到烧杯中,用移液管取出50 ml的滤液,放入洁净的锥形瓶中。
③向锥形瓶中加入2 ml淀粉溶液,然后滴加盐酸或醋酸,将pH值调至3。
2.配制维生素C标准样品
准确称取维生素C 100 mg置于锥形瓶中,加入25 ml蒸馏水溶解。
3.维生素C含量测定
分别用碘溶液滴定维生素C溶液与果蔬组织提取液。滴定过程中,边滴定边晃动锥形瓶,直到提取液呈现蓝色,并且在0. 5 min内不褪色为止。重复滴定两次,记录每次滴定所用碘溶液的体积。最后,计算出两次滴定所用去的碘溶液量的平均值。
4.数据处理
滴定标准维生素C溶液所用去的碘溶液体积为V1,果蔬组织提取液为V2;样品质量为W样品。
果蔬组织中的维生素C含量计算公式
W(C)=(V2/V1)100 mg/W样品 g
四、注意事项
①试样制备后应立即进行滴定,以防止维生素C被空气所氧化。
②接近终点时的滴定速度不宜过快,溶液呈现稳定的蓝色即为终点。
③果汁饮品可过滤后直接测定。
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