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用巴布科克氏法和盖勃氏法测定食品中的脂肪

发布时间:2014-08-04 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:5647

这两种方法都是测定乳脂的标准方法,具有操作简便、迅速的特点,由于样品不需要事先烘干,也叫湿法提取,适用于鲜乳及乳制品脂肪的测定。

对含糖多的乳品由于硫酸可以使糖发生焦化现象,结果误差较大,不宜采用。本法的基本原理是用浓硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白质,同时硫酸使乳中的酪蛋白钙盐转变成可溶性的重硫酸酪蛋白,包裹脂肪球的膜被软化破坏,脂肪游离出来,再通过加热离心,使脂肪完全分离,直接读取脂肪层得到被测乳的含脂率。

1.测定方法

(1)巴布科克氏法准确吸取17.6mL均匀鲜乳,置于巴布科克氏乳脂瓶中,沿瓶颈壁缓缓注入17.5mL。浓硫酸,手持瓶颈回旋,使液体充分混匀,直至无凝块并呈均匀的棕色。将乳脂瓶放人离心机,以约1000r/min的速度离心5min,取出加入60X:以上的热水,直至液面达瓶颈基部,于离心机中离心2min,取出后再加入60℃以上的热水,至液面接近瓶颈刻度标线约4%处,再离心1min。将乳脂瓶置于55~60℃水浴中,待脂肪柱稳定,取出读取脂肪柱最高点与最低点所占的格数,即为样品含脂肪的百分率。

(2)盖勃氏法 在乳脂计中加入10mL硫酸(颈口勿沾湿硫酸).沿管壁缓缓地加入混匀的牛乳11mL,使样品和硫酸不要混合,再加1mL异戊醇,用橡皮塞塞紧,用布包裹瓶口,将瓶口向外向下用力振摇成无颗粒棕色均匀液;瓶口向下静置数分钟后,于65~70℃水浴中放5min,取出擦干,调节橡皮塞使脂肪柱在乳脂计的刻度内,以800~1000r/min的转速离心5min,取出乳脂计,再置于65~70℃水浴中(注意水浴水面应高于乳脂计脂肪层),5min后取出立即读数,脂肪层上下弯月形下缘数字之差,即为脂肪的质量分数。

2.试剂

①浓硫酸:相对密度1.813~1.819(20℃),相当于90 9/6~91%的硫酸。

②异戊醇:相对密度0.809~O.813(20℃),沸程128~132℃。

3.仪器

①巴布科克氏乳脂瓶。

②盖勃氏乳脂计。

③盖勃氏离心机。

④17.6mI及11mL标准移乳管。

4.注意事项

①硫酸除可破坏脂肪球膜,使脂肪游离出来外,还可增加液体相对密度,使脂肪容易浮出。但硫酸浓度过高会使乳炭化成黑色溶液而影响读数,浓度过低则不能使酪蛋白完全溶解,使测定值偏低或脂肪层混浊,因此必须按照规定浓度操作。

②盖勃氏法中所用异戊醇的作用是促使脂肪析出,并能降低脂肪球的表面张力,以利于形成连续的脂肪层。

③65~70℃水浴和离心的目的是促使脂肪离析。

④巴布科克法中采用17.6mL标准吸管取样,实际上注入巴氏瓶中的样品只有17.5mL,牛乳的相对密度为1.03,故样品质量为17.5×1.03=18g。盖勃氏法所用移乳管为11mL,实际注入的样品为10.9mL,样品的质量为11.25g。

⑤罗斯一哥特里氏法、巴布科克法和盖勃氏法都是测定乳脂肪的标准分析方法,其准确度依次降低。

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