随着农药的广泛使用，每年因投毒、误服及环境污染、农药残留造成农药中毒死亡的事件逐渐增多，成为目前食物中毒意外死亡的主要原因之一。因此，农药中毒快速检验已成为化学性食物中毒快速检验的重要内容。

引起化学性食物中毒的农药主要有杀虫剂和除草剂等有机合成农药，包括有机氯、有机磷、氨基甲酸酯类及拟除虫菊酯农药等。由于有机磷农药和氨基甲酸酯类农药使用广泛，引起食物中毒的情况比较突出，因此，本节主要介绍此两类农药的快速检验方法。

一、有机磷农药和氨基甲酸酯类农药快速筛检

有机磷农药是一类人工合成磷酸酯类化合物，具有高效、低残留的优点，是目前我国和世界上使用最多的一类农药。氨基甲酸酯农药是一类含氮杀虫剂，是继有机氯和有机磷之后开发的第三代农药，其理化性质见本书“第七章食品中农药残留量检验”。在快速检测中，主要利用酶化学或免疫化学的原理制成试纸、速测卡或试剂盒，对有机磷或氨基甲酸酯类农药进行快速筛检或半定量。

1．速测卡法(卡片法)

(1)原理：胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色)，有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可快速判断样品中是否存在有机磷或氨基甲酸酯类农药。

(2)分析步骤：取适量可疑物或中毒残留物，以乙酸乙酯提取，取提取液2～3滴于速测卡白色药片上(胆碱酯酶)，放置10分钟进行预反应，将速测卡对折使胆碱酯酶与靛酚乙酸酯重叠接触(红色药片与白色药片叠合)，用手捏3分钟，打开速测卡。结果判断：不产生蓝色为阳性，表示胆碱酯酶被样品中有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制；产生蓝色为阴性，说明胆碱酯酶未被抑制，即未检出样品中存在有机磷或氨基甲酸酯类农药。每批测定应同时做缓冲溶液的空白(阴性)对照卡。

2.酶抑制率法(分光光度法)

(1)原理：在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酸胆碱)水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm波长处测定吸光度值随时间的变化，计算抑制率，根据抑制率可以判断样品中是否有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

(2)分析步骤：分别取缓冲溶液和适量样品提取液，先后加入胆碱酯酶液、显色剂二硫代二硝基苯甲酸(DTNB),摇匀，于37℃放置15分钟以上，加入反应底物硫代乙酰胆碱，摇匀，立即进行测定，分别记录标准溶液和样品溶液反应3分钟时的吸光度值变化△A₀和△A_t，注意保持操作条件的一致性。

抑制率(％)＝[(△A₀-△A_t)/△A₀]×100

当样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示样品中含有机磷或氨基甲酸酯类农药，对阳性结果，采用其他方法进行农药种类的确证实验。

3.酶联免疫吸附法(试剂盒法)采用间接竞争ELISA法。用甲醇提取样品中的有机磷农药。在微孔条上预包被偶联抗原，样品中的残留物有机磷农药与微孔条上预包被的偶联抗原竞争性结合有机磷农药的抗体，形成包被抗原-抗体复合物，再加入酶标二抗体后，用底物四甲基联苯胺(TMB)显色，样品的吸光度值与其所含有机磷农药的含量成负相关，根据抗原抗体的反应，确定待测的有机磷农药。与标准曲线比较可得出有机磷农药残留物的含量。测定机磷农药的线性范围0.5～10ug/ml；灵敏度：1ug/ml。

4．免疫传感器法 免疫传感器(immunosensor)是根据农药和特异性抗体结合发生免疫反应的原理研制成的生物传感器，具有稳定性强、选择性高、检测速度快等特点。以免疫生物分子作为识别元件，通过固定化技术将农药和抗体结合到感受器表面，发生免疫识别反应后，生成的免疫复合物与电化学传感元件产生的物理或化学信号相关联，由能量转化器将农药的浓度信号转化为相应的检测信号，对农药进行快速检测。

二、化学定性鉴定法

1．对硫磷(parathion)检验对硫磷又名1605或E605，淡黄色油状液体，具有一定的挥发性，易碱性水解。在水中溶解度小，不溶于稀酸和石油醚，但能溶于醇、丙酮、苯、三氯甲烷、乙醚和植物油。对人畜毒性大。

(1)硝基酚反应：氢氧化钠将对硫磷水解成对硝基苯酚的钠盐，在碱性条件下互变异构生成黄色醌型化合物。

在样品中加入氢氧化钠溶液，在水浴上加热，可产生黄色；加酸时，则黄色退去；再加碱，其黄色又复出现，则可判断对硫磷的存在。但此系硝基酚的共同反应，应注意区别。

(2)靛酚反应：利用氢氧化钠使对硫磷水解成对硝基酚钠，然后加入锌粉，生成的氢还原对硝基酚钠成对氨基酚钠，与邻甲酚作用，并在空气中氧化下生成蓝色化合物。

2．敌敌畏(dichlorvos)和敌百虫(trichlorfon)的检验敌敌畏又名DDVP，其纯品为无色或微黄色液体，微臭，挥发性强，其水溶液不稳定。敌百虫的纯品为白色结晶形粉末，有特殊臭味，易溶于水和多种有机溶剂，几乎不溶于石油醚。在碱性条件下不稳定，但敌百虫在分解中形成毒性更强的敌敌畏，故通常用同一种方法进行检验。其定性原理是在碱性条件下，其水解生成的二氯乙醛可与其他化合物发生化学反应，产生特殊臭味或有色化合物等。

(1)异腈反应：敌百虫在碱性水溶液中生成敌敌畏，再进一步水解成二氯乙醛。在强碱性介质中，二氯乙醛与苯胺作用，生成具有特殊臭味的异腈化苯。

可将检样用苯提取，提取液加热中挥去苯，残渣用水溶解后，取适量加苯胺和氢氧化钠，小火加热，如有敌敌畏或敌百虫，则有特殊臭味的异腈化苯气体放出。

(2)间苯二酚反应：敌敌畏或敌百虫水解产生二氯乙醛，能与间苯二酚发生缩合反应，生成红色化合物。

三、仪器快速测定方法

样品中农药毒物经有机溶剂提取、固相萃取提取和净化分离提纯后，进行定量检测。主要方法有：薄层色谱扫描法、气相色谱法(GC)、气相色谱/质谱联用分析法(GC/MS)。通过已建立的农药色谱图数据库、质谱图数据库，可对已知农药或未知农药进行快速的定性和定量。

相关链接：有毒元素快速检验

文章来源：《食品理化检验》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。