操作步骤

1．样品的处理

称取500g含油脂较多的样品，1000g含油脂较少的样品，然后用对角线取2／4或2／6，或根据样品情况取具有代表性的样品，在玻璃研钵中研碎，混合均匀后放置广口瓶内，于冰箱中保存。

2．脂肪的提取

(1)含油脂高的样品(如桃酥等) 称取50 g，混合均匀，置于250mL具塞锥形瓶中，加50mL石油醚(沸程为30-60℃)，放置过夜，用快速滤纸过滤后，减压回收溶剂，残留脂肪备用。

(2)含油脂中等的样品(如蛋糕、江米条等)称取100g左右，混合均匀，置于500mL具塞锥形瓶中，加100-200mL石油醚(沸程为30～60℃)，放置过夜，用快速滤纸过滤后，减压回收溶剂，残留脂肪备用。

(3)含油脂少的样品(如面包、饼干等) 称取250-300g样品，粉碎混合均匀后放入500mL具塞锥形瓶中，加入适量石油醚浸泡样品，放置过夜，用快速滤纸过滤后，减压回收溶剂，残留脂肪备用。

3．试样的制备

(1)层析柱的制备于层析柱底部加入少量玻璃棉，少量无水硫酸钠，将硅胶-弗罗里硅土(6+4)共10g，用石油醚湿法混合装柱，柱顶部再加入少量无水硫酸钠。

(2)试样制备 称取制备的脂肪0.50～1.00g，用25mL石油醚溶解移入上述层析柱上，再用100mL二氯甲烷分五次淋洗，合并淋洗液，减压浓缩近干时，用二硫化碳定容至2．OmL，该溶液为待测溶液。

(3)植物油试样的制备称取混合均匀样品2.00g放入50mL烧杯中，加入30mL石油醚溶解后转移到上述层析柱上，再用10mL石油醚分数次洗涤烧杯并转移到层析柱上，用100 mL二氯甲烷分五次淋洗，合并淋洗液，减压浓缩近干，用二硫化碳定容至2.OmL，该溶液为待测溶液。

4．测定

(1)气相色谱参考条件。

色谱柱：长1.5m，内径3mm玻璃柱，质量分数为10％QF-1的Gas Chrom Q(80～100目)。

检测器：FID。

温度：检测室200℃，进样口200℃，柱温140℃。

载气流量：氮气70mL／min，氢气50 mL／min，空气500mL／min。

(2)注入气相色谱3.OµL标准使用液，绘制色谱图，分别量取各组分峰高或面积，进3.0µL样品待测溶液(应视样品含量而定)，绘制色谱图，分别量取峰高或面积，与标准峰高或面积比较计算含量。

结果计算

待测液BHA(或BHT)的质量按以下公式计算。

m₁=hi/hx*Vm/Vi*Vx*Cx

式中：m₁——待测溶液BHA(或BHT)的质量，mg；

hi——样品中BHA(或BHT)的峰高或面积；

hx——标准使用液中BHA(或BHT)的峰高或面积；

Vi——注入色谱样品溶液的体积，mL；

Vm——待测样品定容的体积，mL；

Vx——注入色谱标准使用液的体积，mL；

Cx——标准使用液的浓度，mg／ml。

食品中以脂肪计BHA(或BHT)的含量按以下公式计算。

X= m₁×1000/m₂×l000

式中：X——食品中以脂肪计BHA(或BHT)的含量，g／kg；

m₁——待测溶液中BHA(或BHT)的质量，mg；

m₂——油脂质量(或食品中脂肪的质量)，g。

计算结果保留三位有效数字。

精密度

在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15％。