3.4 测定步骤

3.4.1 提取和净化

称取试样约10g(精确至0.1g)于烧杯中，加入约10g硅藻土，搅拌均匀，放置10 min。将混匀物装入硅藻土柱中(3.3.6)，加入40 mL 二氯甲烷，静置15 min后，用分液漏斗滴80 mL 二氯甲烷于柱中，控制滴入和流出速度为2～4 mL/min。收集全部流出液于另一分液漏斗中，依次用30 mL氢氧化钠溶液、30 mL水洗涤，分出有机相。将有机相于35℃水浴中用旋转蒸发器浓缩至约2～3 mL。将浓缩液转入5 mL具塞离心管内，用2×1mL二氯甲烷淋洗瓶壁，洗液并入离心管内。以空气流浓缩至干。准确加入1 mL流动相(精确至0.02 mL)，在旋涡混匀器上混匀2 min。用3×1mL正己烷抽提三次，每次混匀1 min，以3000r/min离心3 min，并用尖嘴吸管弃去正己烷。余液供液相色谱测定。

3.4.2 测定

3.4.2.1 液相色谱条件

a)色谱柱：ODS-C₁₈柱，125 mm × 4.0 mm(内径)，粒径5 um；

b)流动相：甲醇-水(45+55)；

c)流速：1.0mL/min；

d)测定波长：245 nm；

e)柱温：室温；

f)进样量：20 uL。

3.4.2.2 液相色谱测定

根据样液中氢化可的松含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氢化可的松响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下，氢化可的松的保留时间约为7.6 min。

3.4.3 空白试验

除不加试样外，均按上述测定步骤进行。

3.5 结果的计算和表述

用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中氢化可的松残留含量：

式中：X—试样中氢化可的松的残留含量，mg/kg；

A—样液中氢化可的松的色谱峰面积，mm2；

A_s—标准工作液中氢化可的松的色谱峰面积，mm2；

c—标准工作溶液中氢化可的松的浓度 ug/mL；

V—样液最终定容体积，mL；

m—最终样液所代表的试样量，g。

注：计算结果需扣除空白值。

4 测定低限、回收率

4.1 测定低限

本方法的测定低限为0.01mg/kg。

4.2 回收率

鲜牛乳中氢化可的松添加浓度及其回收率的实验数据：

在0.01 mg /kg时，回收率为88.0%;

在0.05 mg/kg时，回收率为83.8%;

在0.10 mg/kg时，回收率为87.0％。

相关链接：出口乳及乳制品中氢化可的松残留量检验方法（一）

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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