1 范围

本标准规定了婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测定。

2 规范性引用文件

本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。

3 原理

试样中的脂肪用溶剂提取。提取物在碱性条件下与甲醇反应生成脂肪酸甲酯，用配有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪分离顺式脂肪酸甲酯和反式脂肪酸甲酯，外标法定量。

4 试剂和材料

除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1 石油醚：沸程30℃～60℃。

4.2 乙醚(C₄H₁₀O)。

4.3 乙醇(C₂H₆O):体积分数为95%。

4.4 正己烷(C₆H₁₄):色谱纯。

4.5 氨水(NH₃H₂O):25%～28%。

4.6 氢氧化钾(KOH)。

4.7 甲醇(CH₄O)。

4.8 淀粉酶：活力单位：1.5U/mg,根据活力单位大小调整用量。

4.9 无水硫酸钠(Na₂SO₄)。

4.10 氢氧化钾-甲醇溶液(4mol/L)：称取26.4g氢氧化钾，溶于约80mL甲醇中。冷却至室温，用甲醇定容至100mL,加入约5g无水硫酸钠(4.9),充分搅拌后过滤，保留滤液。

4.11 脂肪酸甲酯标准品：十八酸甲酯(C18:0)、反-9-十八碳一烯酸甲酯(C18:l-9t)、顺-9-十八碳一烯酸甲酯(C18:1-9c)、反-9,12-十八碳二烯酸甲酯(C18:2-9t,12t)、顺-9,12-十八碳二烯酸甲酯(C18:2-9c,12c),放入冰箱在-15℃以下保存。

4.12 反式脂肪酸甲酯标准贮备液：浓度分别为10.0mg/mL。称取500mg(精确到0.1mg)反-9-十八碳一烯酸甲酯标准品和反-9,12-十八碳二烯酸甲酯标准品，分别用正己烷溶解并定容至50.0mL。放入冰箱在-15℃以下保存。

4.13 反式脂肪酸甲酯标准中间液：浓度分别为1.0mg/mL。分别吸取两种反式脂肪酸甲酯标准储备液(4.12)10.0mL入同一100mL容量瓶中并用正己烷(4.4)定容。临用前配制。亦作为标准曲线最高浓度。

4.14 反式脂肪酸甲酯标准工作液：临用前配制。分别吸取反式脂肪酸甲酯标准中间液(4.13),0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于10mL容量瓶中,用正己烷定容，此浓度即为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL的标准工作液。

4.15 脂肪酸甲酯标准混合液：将脂肪酸甲酯标准品(4.11),用正己烷配制成脂肪酸甲酯标准混合溶液，其中每种成分的浓度约为0.05mg/mL至0.5mg/mL。用于进行顺反脂肪酸甲酯分离程度及定性的鉴定。

4.16 刚果红溶液：称取1g刚果红溶解稀释至100mL。

5 仪器和设备

5.1 气相色谱仪，带氢火焰离子化检测器。

5.2 旋转蒸发器。

5.3 恒温水浴：40℃～80℃。

5.4 涡旋振荡器。

5.5 离心机：转速≥4000转/分钟。

5.6 毛氏抽脂瓶。

5.7 毛氏抽脂瓶摇混器。

5.8 脂肪收集瓶：圆底烧瓶，与旋转蒸发仪配套。

5.9 天平：感量为0.1mg。

相关链接：婴幼儿食品和乳品中β-胡萝卜素的测定（二）

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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