6 分析步骤

6.1 试样处理

6.1.1 含淀粉的试样：称取混合均匀的固体试样约1.5g,液体试样约5g(精确到0.1mg)于毛氏抽脂瓶中，加入约0.1g淀粉酶(酶活力1.5U/mg),混合均匀后，加入8mL～10mL 45℃±2℃的水，摇匀。盖上瓶塞置于55℃±2℃水浴(5.3)中2h,每隔10min摇混一次。加入两滴约0.1mol/L的碘溶液，检验淀粉是否水解完全。若无蓝色出现，则水解完全，否则将毛氏抽脂瓶重新置于水浴中，直至蓝色消失，取出冷却至室温。

6.1.2不含淀粉的试样：称取混合均匀的固体试样约1.5g,液体试样约10g(精确到0.1mg)于毛氏抽脂瓶(5.6)中，加入10mL 45℃±2℃的水，将试样洗入毛氏抽脂瓶(5.6)的小球中，充分混合，直到试样完全散开，冷却至室温。

6.1.3 脂肪的提取：向毛氏抽脂瓶(5.6)中加入3.0mL氨水(4.5),混匀。置于60℃±2℃水浴(5.3)中15min～20min,冷却至室温。加入10mL乙醇(4.3)和1滴刚果红溶液(4.16),混匀。再加入 25mL乙醚(4.2),塞上软木塞，放到毛氏抽脂瓶(5.6)摇混器上震荡1min,也可采用手动振摇方式， 再加入25mL石油醚(4.1),震荡1min,不低于4000转/分钟离心分层。倾出上清液于脂肪收集瓶(5.8) 中，为第一次提取。在剩余试样液中再加入5mL乙醇，25mL乙醚，25mL石油醚按上述操作步骤进 行第二次提取。用离心机(5.5)离心分层后倾出上清液与第一次的上清液合并。将脂肪收集瓶(5.8) 置于旋转蒸发器(5.2)上，在60℃±2℃通入氮气条件下旋转蒸发除去溶剂，保留残渣，即为脂肪。

6.1.4 脂肪酸甲酯的制备：将上述脂肪用正己烷(4.4)溶解并定容至10.0mL,取出3.0mL于10mL 具塞试管中，加入0.3mL氢氧化钾-甲醇溶液(4.10)。盖紧瓶盖，涡旋振荡器(5.4)上剧烈振摇2min, 4000转/分钟离心5min后将上清液转入气相色谱试样瓶中，此为试样测定液。

6.2 测定

6.2.1 参考色谱条件

色谱柱：填料为氰丙基芳基聚硅氧烷的毛细管柱，柱长100m,内径0.25mm,膜厚0.2um；或同等 性能的色谱柱。

进样口温度：250℃；载气(N₂)。

检测器温度：300℃。

分流比：10:1。

进样量：1.0uL。

程序升温：如表1所示。

表1程序升温条件

6.2.2 标准曲线的制备

在仪器最佳工作条件下，对系列标准工作液(4.14)分别进样，以峰面积为纵坐标，标准工作液浓 度为横坐标绘制标准工作曲线。

6.2.3 反式脂肪酸甲酯色谱峰的鉴别

对脂肪酸甲酯标准混合溶液(4.15)进样，进行顺反脂肪酸甲酯分离程度及定性的鉴定。

6.2.4 试样液的测定

将试样测定液注入气相色谱仪，查标准曲线得到试样测定液中反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二 烯酸甲酯的质量浓度。

7 分析结果的表述

试样中反十八碳一烯酸和反十八碳二烯酸含量分别计为X₁和X₂，按式(1)分别计算：

式中：

X_(1或2)—试样中反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸含量，单位为毫克每百克(mg/100g)；

V—试样的定容体积，单位毫升(mL)；

m—试样质量，单位为克(g);

c_i—试样测定液中反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的质量浓度，单位为毫克每毫升 (mg/mL)；

M_ai—反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸的分子量；

M_bi—反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的分子量。

试样中反式脂肪酸的总含量X,按式(2)计算：

X= X₁+X₂......................(2)

式中：

X—反式脂肪酸的总含量，单位为毫克每百克(mg/100g)；

X₁—试样中反十八碳一烯酸的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)；

X₂—试样中反十八碳二烯酸的含量，单位为毫克每百克(mg/100g)。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。

8 精密度

在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

9 其他

本标准检出限为：反式脂肪酸总含量30mg/kg。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。