A.4 其他着色物质的测定

A.4.1 试剂和材料

A.4.1.1 三氯甲烷。

A.4.1.2 氢氧化钾甲醇溶液：30g/L。

A.4.1.3 展开剂：正己烷+三氯甲烷+乙酸乙酯=70+20+10。

A.4.1.4 薄层色谱板：硅胶，厚度0.25mm。

A.4.2 仪器和设备

分光光度计。

A.4.3 分析步骤

A.4.3.1 薄层色谱板的预处理

将薄层板浸于氢氧化钾甲醇溶液中使之完全湿润，然后取出薄层板，在空气中干燥5min，置于110℃±2℃干燥箱中活化1h，置于装有氯化钙的干燥器中冷却并保存待用。

A.4.3.2 试样溶液的制备

称取约0.08g试样，精确至0.001g，溶于100mL三氯甲烷中。取400uL该溶液均匀地点样于离薄层板底边2cm的基线上。点样后，立刻在预先用展开剂饱和的层析缸中展开，适当避光，直到展开剂前沿线移动至距离基线10cm处。取出薄层板，在室温下挥发大部分溶剂，标记主色谱带和其他类胡萝卜素相应的色谱带。移取包含主色谱带的硅胶吸收剂，转入一支100mL具塞离心管中，加入40.0mL三氯甲烷(溶液1)。移取包含其他类胡萝卜素的相应色谱带的硅胶吸收剂，转入另一支50mL具塞离心管中，加人20.0mL三氯甲烷(溶液2)。机械振摇离心管10min后，再离心5min。取10.0mL溶液用三氯甲烷稀释至50.0mL(溶液3)。

A.4.3.3 测定

分别将溶液2和溶液3置于1cm比色皿中，以三氯甲烷做空白对照，用合适的分光光度计在最大吸收波长处(474nm)测定吸光度。

A.4.4 结果计算

其他着色物质(β-阿朴-8'-胡萝卜素醛除外的其他类胡萝卜素)的质量分数w₂按式(A.2)计算：

式中：

A₂——溶液2的吸光度；

10——溶液浓度比；

A₃——溶液3的吸光度。

A.5 灼烧残渣的测定

A.5.1 试剂和材料

硫酸。

A.5.2 分析步骤

称取约2g试样，精确至0.0002g，置于已在800℃±25℃灼烧至恒重的坩埚中，用小火缓缓加热至试样完全炭化，放冷后，加约1.0mL硫酸使其湿润，低温加热至硫酸蒸汽除尽后，移入高温炉中，在800℃±25℃灼烧至恒重。

A.5.3 结果计算

灼烧残渣的质量分数w₃按式(A.3)计算：

式中：

m₁——残渣和空坩埚的质量，单位为克(g)；

m₂——空坩埚的质量，单位为克(g)；

m——试样的质量，单位为克(g)。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(四)》

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