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溶剂提取法——样品预处理方法(二)

发布时间:2015-05-11 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2534

在同一溶剂中,不同的物质具有不同的溶解度。利用样品各组分在某一溶剂中溶解度的差异,将各组成分完全或部分地分离的方法,称为溶剂提取法。此法常用于维生素、重金属、农药及黄曲霉毒素的测定。

溶剂提取法又分为浸提法、溶剂萃取法、盐析法。

(1)浸提法:用适当的溶剂将固体样品中的某种待测成分浸提出来的方法,又称液一固萃取法、浸泡法。

一般提取剂的选择要使提取效果符合相似相溶的原则,故应根据被提取物的极性强弱选择提取剂。对极性较弱的成分(如有机氯农药)可用极性小的溶剂(如正己烷、石油醚)提取;对极性强的成分(如黄曲霉毒素B1)可用极性大的溶剂(如甲醇与水的混合溶液)提取。溶剂沸点宜在45一80℃,沸点太低易挥发,沸点太高则不易浓缩,且对热稳定性差的被提取成分也不利。此外,溶剂要稳定,不与样品发生作用。

提取方法有振荡浸渍法、捣碎法、索氏提取法。

振荡浸渍法是将样品切碎,放入一合适的溶剂系统中浸渍、振荡一定时间,即可从样品中提取出被测成分。此法简便易行,但回收率较低。

捣碎法是将切碎的样品放入捣碎机中,加溶剂捣碎一定时间,使被测成分提取出来。此法回收率较高,但干扰杂质溶出较多。

索氏提取法是将一定量样品放入索氏提取器中,加入溶剂加热回流一定时间,将被测成分提取出来。此法溶剂用量少,提取完全,回收率高,但操作较麻烦,且需专用的索氏提取器。

(2)溶剂萃取法:利用某组分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同,使其从一种溶剂转移到另一种溶剂中,而与其他组分分离的方法。此法操作迅速,分离效果好,应用广泛,但萃取试剂通常易燃、易挥发,且有毒性。

选择萃取溶剂时应注意其与原溶剂不互溶,但对被测组分有最大溶解度,而对杂质有最小溶解度;或被测组分在萃取溶剂中有最大的分配系数,而杂质只有最小的分配系数。经萃取后,被测组分进人萃取溶剂中,同仍留在原溶剂中的杂质分离开。此外,还应考虑两种溶剂分层的难易以及是否会产生泡沫等问题。

萃取通常在分液漏斗中进行,一般需经4一5次萃取,才能达到完全分离的目的。当用比水轻的溶剂,从水溶液中提取分配系数小,或振荡后易乳化的物质时,采用连续液体萃取器较分液漏斗效果更好。烧瓶内的溶剂被加热,产生的蒸汽经过管上升至冷凝器中被冷却,冷凝液化后滴入中央的管内并沿中央管下降,从下端成为小滴,使欲萃取的液层上升,此时发生萃取作用。萃取液经回流至烧瓶内后,溶液再次气化,这样反复萃取,可把被测组分全部萃入溶剂中。

(3)盐析法:向溶液中加入某一盐类物质,使溶质溶解在原溶剂中的溶解度大大降低,从而从溶液中沉淀出来。例如,在蛋白质溶液中,加入大量的盐类,特别是加入重金属盐,蛋白质就从溶液中沉淀出来。在蛋白质的测定过程中,也常用氢氧化铜或碱性醋酸铅将蛋白质从水溶液中沉淀下来,将沉淀消化并测定其中的含氮量,据此以断定样品中纯蛋白质的含量。

在进行盐析工作时,应注意溶液中所要加入的物质的选择。它不破坏溶液中所要析出的物质,否则达不到盐析提取的目的。此外,要注意选择适当的盐析条件,如溶液的pH值、温度等。盐析沉淀后,根据溶剂和析出物质的性质和实验要求,选择适当的分离方法,如过滤、离心分离和蒸发等。

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