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甲液配制
称丹宁酸5g、氯化高铁 1.5g,溶于100mL 蒸馏水中,待溶解后加入1%氢氧化钠溶液 1mL和15%的甲醛溶液 2mL。
乙液配制
称2g 硝酸银溶于100mL 蒸馏水中;在90mL 乙液中滴加浓氢氧化铵溶液,到出现沉淀后,再滴加使其变为澄清;然后用其余10mL乙液小心滴加至澄清液中,至出现轻微雾状为止(此为关键性操作,应特别小心);滴加氢氧化铵和用剩余乙液回滴时,要边滴边充分摇荡。
注意:乙液当天配,当天使用,2~3d基本无效。
染色
在风干的载玻片上滴加甲液,4~6min后,用蒸馏水轻轻冲净;再加乙液,缓缓加热至冒汽,维持约30s(加热时注意勿使出现干燥面);在菌体多的部位可呈深褐色到黑色,停止加热,用水冲净,干后镜检。
结果
菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
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