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| 传代方法 | ①宿主细胞HEL 299培养
将冻存细胞复苏至T25瓶中培养,在培养温度37℃、气体环境5%CO2+95%空气的培养条件下培养3天密度可达到80%,此时接种病毒。 ②病毒接种 将BK多瘤病毒置于37℃水浴锅中溶解。将密度达到80%的HEL 299去除细胞培养基后,用PBS轻轻润洗1-2遍以去除残留培养基。将1ml病毒液接种到宿主细胞中,在37℃、5%CO2+95%空气的条件下吸附1-2小时,每15分钟轻轻摇动一次T25瓶,使病毒分布更加均匀。 ③病毒培养 吸附结束后,通过添加6-8mL病毒生长培养基结束吸附。置于培养箱中进行培养14-23天。期间需要每日观察,当宿主细胞全部产生病变后开始收集病毒。 ④病毒液收集 收获时将细胞反复冻融2次,然后用0.22μm孔径过滤器收集病毒。 |
| 安全等级 | 2 |
| 形态 | 细胞退化;细胞变圆; |
| 分离基物 | 这种菌株是1970年从伦敦一名肾移植患者的尿液中分离出来的。 |
| 应用领域 | 本参考品由河南省工业微生物菌种工程技术研究中心研制,是BK多瘤病毒的灭活颗粒,可用于BK多瘤病毒的质控品、标准物质研制,核酸检测阳性对照、核酸检测研究等。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
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