河南普天同创计量有限公司
普天同创计量
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| 培养基 | 酵母膏:5.0g,蛋白胨:10.0g,NaCl:10.0g,pH:7.0(25℃) |
| 传代方法 | ①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min; ②混合:取200μl 感受态细胞与5-10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min; ③热激导入:42℃静置 90s; ④收缩膜孔:冰浴 2min; ⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min); ⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落; ⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒 |
| 生长条件 | 37℃;18-24小时;好氧; |
| 存储条件 | 2-8℃ |
| 安全等级 | 0 |
| 应用领域 | pEYFP-N1 是一种用于哺乳动物细胞的黄色荧光蛋白融合表达载体,核心用途是通过 CMV 强启动子驱动目的基因与 EYFP 的 N 端融合表达,便于利用黄色荧光信号在活细胞中实时追踪目的蛋白的亚细胞定位、表达水平及动态变化。其特点包括:携带 Neo/G418 真核筛选标记用于稳定细胞系构建,以及 Kan 抗性和 pUC 高拷贝复制起点用于大肠杆菌扩增;EYFP 激发峰 513 nm、发射峰 527 nm,荧光亮度与 EGFP 相当,适合活细胞成像及荧光共振能量转移(FRET) 研究。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
pVAX1
BNCC341621
pLV2-MPro-mCherry-Puro
BNCC396288
pLV3-CMV-mKate2-Blast
BNCC396800
DH5α(含pET-26b质粒)大肠杆菌
BNCC397056
pUC57-CA
BNCC397568
DH5α(含pCMV-3×FLAG-miniTurboID-13XGGGGS-MCS-NLS-Neo质粒)大肠杆菌
BNCC399616
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