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pET-45b(+)-Tn5-普天同创

pET-45b(+)-Tn5

pET-45b(+)-Tn5
  • 价格: ¥300
  • 编号:BNCC399262
  • 形式:冻干粉
  • 交付:当天
  • 品牌:BNCC
  • 用途:
    pET-45b(+)-Tn5 是一种用于大肠杆菌的蛋白表达载体,基于 pET-45b(+) 骨架构建,利用 T7 启动子驱动表达高活性 Tn5 转座酶,其 N 端带有 6×His 标签便于镍柱亲和纯化,携带氨苄青霉素抗性和高拷贝复制起点,全长约 6703 bp。 其核心应用是制备用于下一代测序(NGS)文库构建的 Tn5 转座酶,尤其适用于 ATAC-seq 等染色质开放性检测实验。该载体表达的 Tn5 带有 E54K、E110K、P242A、L372P 四个突变,显著提升了转座酶活性,使其能够高效地对 DNA 进行片段化并同时连接测序接头。
基本信息 相关资源
pET-45b(+)-Tn5基本信息
培养基 酵母膏:5.0g,蛋白胨:10.0g,NaCl:10.0g,pH:7.0(25℃)
传代方法 ①溶解:向质粒干粉中加入20μL无菌水进行溶解,室温静置1min; ②混合:取200μl 感受态细胞与5-10μl 质粒 DNA 混匀,冰上放置 30min; ③热激导入:42℃静置 90s; ④收缩膜孔:冰浴 2min; ⑤修复培养:毎管加 800μl 液体培养基,37 ℃摇床培养1h(150 r/min); ⑥筛选培养:将适当体积(100 μl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落; ⑦提取:挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒
生长条件 37℃;18-24小时;好氧;
存储条件 2-8℃
安全等级 0
应用领域 pET-45b(+)-Tn5 是一种用于大肠杆菌的蛋白表达载体,基于 pET-45b(+) 骨架构建,利用 T7 启动子驱动表达高活性 Tn5 转座酶,其 N 端带有 6×His 标签便于镍柱亲和纯化,携带氨苄青霉素抗性和高拷贝复制起点,全长约 6703 bp。 其核心应用是制备用于下一代测序(NGS)文库构建的 Tn5 转座酶,尤其适用于 ATAC-seq 等染色质开放性检测实验。该载体表达的 Tn5 带有 E54K、E110K、P242A、L372P 四个突变,显著提升了转座酶活性,使其能够高效地对 DNA 进行片段化并同时连接测序接头。
共享方式 公益性共享
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