GV3101农杆菌化学感受态细胞BNCC370078 质粒|普天同创

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Agrobacterium GV3101 Chemically Competent Cell

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GV3101农杆菌化学感受态细胞基本信息

培养基	酵母膏：5.0，蛋白胨：10.0，氯化钠：10.0，琼脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃）
传代方法	1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。 2.每100μl感受态加1ug（体积不大于10ul）质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 3.加入700μl无抗生素的LB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。 4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天（当平板只含有50ug/ml kan 时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 则需要28℃培养72-90h）。
生长条件	28℃；18-24h；好氧；
存储条件	-80℃
安全等级	1
共享方式	公益性共享