本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业（如餐饮业、食品加工等）排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。

1．方法原理

应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琉拍酸脱氢酶将纸片上的TTC（红四碳唑）还原成不可逆的甲臜(Formazane）产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。

2．水样采集

用采水器或其他灭菌器采集水样500m1放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需加1.5％硫代硫酸钠5m1除去余氯。

3．方法和步骤

每份预监测水样，接种水样总量为55.5m1，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每张大纸片接种l0ml水样，五张小纸片每张接种lml，另五张小纸片接种1：10稀释的水样lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘中。测总大肠菌群37℃±1℃培养18-24h观察结果，测粪大肠菌群44.5℃±1℃培养18-24h，观察结果。

4．判定标准

①纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强阳性。

②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。

③纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。

④酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。

⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。

5．报告结果

根据阳性纸片张数，查MPN值表，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。