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藻类是水体中的初级生产者,也是水生食物链的基础环节。在光的作用下它们吸收水中的无机营养盐类和二氧化碳,制造有机物。它们的存在无论是对水体生产力还是水体污染的自净作用均具有十分重要的意义。因此,在研究毒物或废水对水环境的影响时,都把藻类测试作为一项重要内容。
藻类生长抑制试验的目的是确定受试物对单细胞藻类生长的影响,可用于受试物对藻类短期暴露效应的初评。当暴露使藻类的生长率低于未经暴露的对照组时,称为藻类生长抑制。
单细胞藻类个体小,世代时间以小时计算,采用本方法可以在较短时间内得到受试物(化学品或环境样品)对藻类许多世代及在种群水平上的影响。所得结果可反映受试物对水体中初级生产营养级的影响。
将不同浓度的受试物加到处于对数生长期的藻培养物中,在规定的条件下进行培养,每隔24h测定藻类种群浓度或生物量(重量)。试验时间不少于96h。与对照相比较可确定生长抑制情况。
1.受试化学品的必备资料
水溶解度 水溶液中的定量分析方法
蒸汽压 在水中和光中的化学稳定性
结构式 正辛醇/水的分配系数
纯度 快速生物降解试验结果
2.仪器设备
①一般的藻类实验室设备。
②试验容器:如三角瓶等,根据需要可选择一定容量的试验容器,同一批试验的容器应规格一致。为保证CO2的交换,要有一定的表面积一体积比。125ml的三角瓶中测试液体积应为40-60ml,250ml三角瓶中为70-100ml,500ml三角瓶中为100-150m1。
③照度计:球面照度计和普通照度计。
④培养设备:建议使用温度范围为21-25℃±2℃且连续均匀光照,光谱范围为400-700nm,光通量为0.72×1020光子/(m2·s)的培养箱(用球面测量计测定可产生光强为80001ux的光),光照周期,即光暗比为12:12或14:10。
⑤机械振荡器100±10次/min或定时人工摇动若干次。
⑥培养容器应用棉塞、海绵塞、滤纸、纱布((2-3层)、锡箔纸封闭。挥发性化学品试验中,应采用磨口玻璃塞完全密闭。
⑦检测细胞浓度的设备,如电子颗粒计数仪、荧光计、分光光度仪、比色计、显微镜。
在使用分光光度仪测定细胞浓度时,为了有效测定,必须使用至少4cm的吸收池作一曲线。
3.受试生物
建议使用生长快速的绿藻品种,以便于培养和试验,如:羊角月芽藻(Selenastrumcapricormutum)、斜生栅藻(Scenedesmusobliquus)、普通小球藻(ChlorellaVulgaris)。若使用其他藻类,应标出拉丁名。
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