一、实训目标

1．掌握内标法原理及其计算；

2．熟悉氢焰检测器在含水样品中微量有机组分测定中的应用。

二、实训原理

内标对比法（已知浓度样品对照法）是在校正因子未知时内标法的一种应用。在药物分析中，校正因子多是未知的，这时可采用内标对比法定量。先配制待测组分i的已知浓度的对照品溶液，加入一定量内标物s（相当于测定校正因子）；再将内标物按相同量加入同体积样品中，分别进样，由下式计算样品中待测组分的含量。

（ci%)_样=(Ai／As）_样/(Ai/As)_对×（ci%)_对

对照品与样品为同一物质，因此可用峰高代替峰面积计算。

（ci%)_样=(hi／hs）_样/(hi/hs)_对×（ci%)_对

氢焰检测器（FID）是GC中常用的一种高灵敏度检测器，是通过测定有机物在氢焰作用下化学电离形成的离子流强度进行检测的。其特点是只对含碳化合物有明显响应，而对非烃类、惰性气体或在火焰中难电离或不电离的物质，则讯号较低或无信号。H2O是FID不敏感物质，故FID对本实验中待测乙醇、丙醇有响应，而无水峰。因此，FID特别适用于含水样品中微量有机组分的测定。

三、实训仪器与试剂

1．仪器

科创900A型气相色谱仪；容量瓶；吸量管；胶头滴管。

2．试剂

正丁醇；无水乙醇；蒸馏水。

四、实训步骤

1．实验条件

2．溶液配制

(1）对照品溶液制备精密移取无水乙醇1.00mL及正丁醇（内标物）1.00mL，置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

(2）样品溶液的制备精密移取待测样品2.00mL及正丁醇（内标物）1.00mL，置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。

3．测定

待基线平直后，将对照品溶液和样品溶液分别进样三次，每次2μL，从色谱图上测定各组分的峰高及半峰宽，计算无水乙醇的含量。

4．数据记录与处理

五、注意事项

(1)FID属于质量型检测器，其响应值（峰高h)取决于单位时间内引入检测器的组分质量。当进样量一定时，峰面积与载气流速无关，但峰高与载气流速成正比，因此当用峰高定量时应保持载气流速恒定。但在内标对比法中由于所测参数为组分峰响应值之比（即相对响应值），故以峰高定量时载气流速的变化对测定结果影响小。

(2)采用内标对比法定量时，最好考虑内标工作曲线（以对照液中组分与内标峰响应值之比作纵坐标、以对照液浓度为横坐标作图），若已知工作曲线通过原点且在其线性范围内时，再采用内标对比法定量；同时对照液的浓度应与样品溶液中待测组分的浓度尽量接近，这样可以提高测定准确度。氢气是一种危险气体，实验过程中一定要按要求操作，而且色谱实验室要有良好的通风设备。