色谱法是利用在固定相和流动相之间相互作用的平衡场内物质行为的差异，从多组分混合物中使单一组分互相分离，继而进行定性检出和鉴定、定量测定和记录的分析方法。

一.色谱法的分类

色谱法的分类方法虽然有好几种，但各种分类方法的依据或出发点是不一样的。根据流动相和固定相组合方式的不同，可分为液相色谱和气相色谱等；按照操作技术的不同，色谱法又可分为洗脱法、顶替法和迎头法等；按照色谱法的分离机理．则可分为吸附色谱法、离子交换色谱法、分配色谱法、沉淀色谱法和排阻色谱法等。

在实际工作中的色谱方法的分类，一部分是根据两相状态的不同，而另一部分是根据色谱的分离机理的不同。

1．按两相的状态分类

在色谱分析中有流动相和固定相两相。流动相就是色谱分析过程中携带组分向前移动的物质。固定相就是色谱分析过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面上的液体。用液体作为流动相的称为液相色谱法，用气体作为流动相的称为气相色谱法。又因固定相也有两种状态，按照使用流动相和固定相的不同，可将色谱法分为液-固色谱法，即流动相为液休，固定相为具有吸附活性的固体；液-液色谱法，即流动相为液体，固定相为液体；气-固色谱法，即流动相为气体，固定相为具有吸附活性的固体；气-液色谱法，即流动相为气体，固定相为液体。

2．按色谱分离机理分类

(1)吸附色谱法

吸附色谱法是以固定相为吸附剂，利用吸附剂对不同组分吸附性能的差别进行色谱分离和分析的方法。这种色谱法根据使用的流动相不同，又可分为气-固吸附色谱法和液-固吸附色谱法。

(2)分配色谱法

分配色谱法是利用不同组分在流动相和固定相之间分配系数（或溶解度）的不同而进行分离和分析的方法。根据使用的流动相不同，又可分为液-液分配色谱法和气-液分配色谱法。

(3)离子交换色谱法

离子交换色谱法是用一种能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的色谱方法。这种色谱法广泛应用于无机离子、生物化学中各种核酸衍生物、氨基酸等的分离。

(4)凝胶色谱法

凝胶色谱法是利用某些凝胶对不同大小的组分分子产生不同的滞留作用而达到分离目的的色谱方法。这种色谱法主要用于较大分子的分离，也称为筛析色谱法和尺寸（空间）排阻色谱法。

3．按固定相的性质分类

(1)柱色谱法

柱色谱法可分为两大类。一类是将固定相装入色谱柱内，称为填充柱色谱法。另一类是将固定相涂在毛细管（毛细管中心是空的）内壁，称为开管型毛细管柱色谱法。如果先将固定相填满一根管子，再将管子拉成毛细管或再将固定液涂于管内载体上，称为填充型毛细管柱色谱法。

(2)纸色谱法

纸色谱法是以纸为载体，以纸纤维吸附的水分（或吸附的其他物质）为固定相，样品点在纸条的一端，用流动相展开进行分离和分析的色谱法。

(3)薄层色谱法

薄层色谱法是将吸附剂（或载体）均匀地铺在一块玻璃板或塑料板上形成薄层，在此薄层上进行色谱分离的方法。按分离机理可分为吸附法、分配法、离子交换法等。

4．按色谱操作技术分类

(1)冲洗法

冲洗法是将试样加在色谱柱的一端，选用在固定相上被吸附或溶解能力比试样组分弱的气休或液体冲洗柱子，由于混合物中各组分在固定相上被吸附或溶解能力的差异，各组分被冲洗出来的顺序不同，从而达到分离的目的。这种方法的分离效能较高，适合于多组分混合物的分离，是一种使用最广泛的色谱方法。

(2)迎头法

迎头法是使多组分混合物连续进入色谱柱，混合物中吸附或溶解能力最弱的组分最先流出色谱柱，其次是最弱的与吸附、溶解能力稍强的组分的混合物流出色谱柱．然后是最弱的、稍强的、较强的三个组分的混合物流出色谱柱，依此类推。

(3)顶替法

将混合物试样加入色谱柱，将选择的顶替剂加入惰性流动相中，这种顶替剂对固定相的吸附或溶解能力比试样中所有组分都强，当含顶替剂的惰性流动相通过柱子后，试样中各组分依吸附或溶解能力的强弱顺序被顶替出色谱柱，最弱者最先流出，最强者最后流出。利用这种方法可从混合物中分离出几种纯品，有利于做分析。该法的分离效果优于迎头法。

二.色谱法的特点

色谱法与其他分析方法相比，其显著特点是能在分析过程中分离出纯物质，并测定该物质的含量。所以，对一种组分用色谱法可以得到该组分的两种信息，即从注入到检出的保留值和质量。色谱法也可用作定性分析，但一般而言，色谱法的定性能力较差，而作为定量方法却是非常重要的手段。色谱仪与质谱仪或傅里叶变换红外光谱仪联用，可以提高其定性能力。气相色谱法和液相色谱法已有十分完善的联用仪器在市场上出售。

色谱法在使用上的特点是：仅用所购置的仪器还不能得到满意的数据。其他仪器如红外光谱仪和质谱仪等，若制备好样品并置于样品架，开动仪器就能得到有用的数据。对于这些仪器，即使完全不懂分析仪器的工作原理，只要操作方法没有错误，就能得到所需的信息。但是，色谱仪与上述仪器不同。分析工作者必须自己根据分析目的，选择固定相和流动相的种类、组成以及检测器，并组成分析系统。而且从理论上选择的分析系统也不能保证是最佳的，只能通过大量实验加以证实。有时即使重复实验文献记载的分析条件，也得不到完全相同的分离能力和灵敏度。这是因为文献中往往存在未记载的分析条件或不可能记载的分析条件，以及分析工作者没有认识到的分析条件，如流动相纯度、化学键合硅胶中残余的硅醇基含量、柱外死体积、标准样品的纯度、试液的稳定性、仪器的温度差异、仪器配件系统的污染程度等，均会影响分离。所以，在重复实验文献的方法而得不到满意结果时，分析工作者必须具备改善分析条件获得良好数据的能力。为此，要求分析工作者必须理解色谱法的理论，从逻辑上探讨错误的原因，并不断积累经验。