(2006-07-10发布，2006-10-01实施)

1 应用范围

本部分适用于测定酸性土壤有效磷含量。

2 方法提要

酸性土壤中的磷主要以Fe-P和A1-P形态存在，利用F-具有在酸性条件下溶解络合Fe³⁺和A1³⁺的能力，使一定量具潜在活性的磷酸铁、磷酸铝中的磷释放出来。同时由于H⁺的作用亦溶解出部分活性较大的Ca-P中的磷。

本方法严格规定土液比为1:10，浸提温度为20～25℃，振荡提取时间为30min。所提取出的有效磷以钼锑抗比色法测定。

3 主要仪器设备

3.1 恒温室

3.2 往复式振荡机

3.3 分光光度计

3.4 塑料瓶(150mL)

3.5 比色管(25mL)

4 试剂

4.1 5％(V/V)硫酸溶液

吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后以水稀释至100mL。

4.2 0.5％ (m/V)酒石酸锑钾溶液

称取酒石酸锑钾(KSbOC₄H₄O₆·1/2H₂O，化学纯)0.5g溶于100mL水中。

4.3 钼锑贮备液

量取126mL浓硫酸(密度1.84)，缓缓倒入约400mL水中，搅拌，冷却。另称取10.0g钼酸铵溶于约60℃的300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100mL 0.5％酒石酸锑钾溶液，冷却后，加水稀释至1L,摇匀，贮于棕色试剂瓶中。此贮备液含钼酸铵100，硫酸2.25mol/L。

4.4 钼锑抗显色剂

称取1.5g抗坏血酸(左旋，旋光度+21^o～+22^o)溶于100 mL钼锑贮备液中，此溶液有效期ld，须随配随用。

4.5 磷标准贮备液

准确称取经105℃烘干 2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，转入1L容量瓶中，用水定容，即为100ug/mL磷标准贮备液，在冰箱中可以长期保存。

4.6 5ug/mL磷标准溶液

吸取5.00mL磷标准贮备液放入100mL容量瓶中，加水定容即为5ug/mL磷标准溶液，此溶液不宜久存。

4.7 二硝基酚指示剂

称取0.2g 2,4-二硝基酚或2,6-二硝基酚溶于100mL水中。

4.8 1+3氨水溶液

4.9 0.03mol/L氟化铵-0.025mol/L盐酸提取液。

称取1.llg氟化铵，溶于800mL水中，加25mL lmol/L盐酸溶液，用水稀释至1L,贮于塑料瓶中。

4.10 3％(m/V)硼酸溶液

称取30.Og硼酸，溶于约9OOmL热水中，冷却后稀释至1L。

5 分析步骤

称取通过2mm孔径筛的风干试样5g(精确至0.01g)至于150mL塑料瓶中，加入50.0mL 0.03mol/L氟化铵-0.025mol/L盐酸提取液，在20～25℃恒温条件下振荡30min(浸提剂温度亦须20～25℃，振荡机速率160～200r/min)，取出后立即用无磷滤纸干过滤于塑料瓶中。同时做空白试验。

准确吸取滤液5.00～10.00mL(含P5.00～20.00ug)于50m1一容量瓶中，加入10mL 3％硼酸溶液，摇匀，加水至30mL左右，再加入二硝基酚指示剂2滴，用5％硫酸溶液和1+3氨水溶液调节溶液刚显微黄色。加入5.00mL钼锑抗显色剂，用水定容，在室温20℃以上的条件下，放置30min。

显色后的样品溶液在分光光度计上，用700nm波长，2cm光径比色皿，以空白试验溶液为参比液调零，进行比色，读取吸光度。从标准曲线上查得相应的含磷量或通过回归方程计算出样品显色液中含磷量。

标准曲线绘制：准确吸取5ug/mL磷标准溶液0,0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL,2.50mL,3.00mL于25mL比色管中，加入浸提剂10.00mL，显色剂5.00mL,慢慢摇动，使CO₂逸出，再以水稀释至刻度，充分摇动，逐尽CO₂，定容，即为含磷量0.00，0.10ug/mL，0.20ug/mL，0.30ug/mL，0.40ug/mL，0.50ug/mL，0.60 ug/mL的磷标准系列溶液。在室温高于20℃处放置30min后，按上述样品待测液分析步骤、条件进行比色，测量吸光度，绘制标准曲线或建立回归方程。

6 结果计算

式中c—从标准曲线上查或回归方程求得显色液磷浓度，ug/mL;

V—显色液体积，mL，此方法为25mL；

D—分取倍数，即试样提取液体积／显色时分取体积，本试验为50/10;

1000—将ug换算为mg和将g换算为kg;

m—风干试样质量，g;

平均测定结果以算术平均值表示，保留小数点后一位。

7 精密度

表1平行测定结果允许差

8 注释

在本方法所规定的酸度及钼酸铵浓度下，钼锑抗法显色温度以20～40℃为宜，如室温低于20℃，可放置在30～40℃烘箱中保温30min，取出冷却后比色。