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HPLC使用者需要重视优化仪器的工作环境、重视对仪器的保养维修。
电源是影响HPLC稳定性的主要因素之一。因此,使用者必须要注意仪器使用的电源条件。本节将简单讨论HPLC仪器的保养维修。
1. 对电源的要求
1.1电源电压的稳定性
HPLC是一种很精密的仪器,无论是从仪器的高压泵角度来讲,还是从检测器角度讲,都是如此。因此,它对电源的要求是较高的,例如,它要求交流供电电源的稳定性较高,最好使用电压波动在5%以内的交流电子稳压器。但是,目前我国许多使用者不懂得HPLC对交流电源的要求,所以在市电稳定性极差的情况下,有的使用者不用交流电子稳压器,有的虽然使用了交流电子稳压器,但交流电子稳压器的性能很差,在分析测试时,连肉眼都可以很明显地看出交流电子稳压器在大幅度地波动,这些都会严重影响HPLC使用时的稳定性。
1.2 电源的频率
我们还必须注意,使用的交流电源要求最好是(50±1)Hz的频率。但是,许多地方采用自发电,其电源频率很不准,有的只有45Hz左右,这是不合适的。因为仪器里面的滤波、噪声等电路设计,都是根据(50±1)Hz的频率来考虑的,也就是说,滤波、噪声都是以50Hz及其倍频来考虑的。特别是影响HPLC分析误差的噪声,在许多HPLC仪器中,设计时都是主要考虑50Hz,100Hz等频率的噪声。如果采用的频率是45Hz左右,将会严重影响HPLC的噪声和稳定性。
尤其是在有些地方,市电电源稳定性很差,使用者如果不用交流电子稳压器,将严重影响分析结果的可靠性。
2. 对环境的要求
环境是影响HPLC稳定性的主要因素之一。因此,使用者必须注意仪器使用时的环境条件。本节将简单讨论HPLC对环境的要求。
2.1要注意防止干扰
首先,要注意防止电、磁场的干扰。电、磁场的干扰是影响HPLC稳定性的重要因素,对此有些使用者,往往很不注意。作者曾碰到这样一件事:有一位HPLC的使用者将仪器的电源和空调机的电源插在同一个电源插座上。在分析测试时,仪器很不稳定,因此,他马上说是仪器不好,并通知制造厂的维修工程师来维修。制造厂的维修工程师经过检查,认为仪器没有问题。双方争论了很久,最后向作者咨询。作者发现仪器的电源和空调机的插在同一个插座上,于是建议他排除这个干扰。后来电源插座一经分开,仪器马上恢复了正常。
一般来讲,安放HPLC仪器的房间,应该远离电场、磁场干扰。有人认为,只要不在一个房间就没有关系,这是不对的。因为只要干扰电场、磁场有足够的强度,哪怕是隔壁房间或者隔离几个房间,也是不行的,所以使用者一定要注意这个问题。
2.2要注意防湿防潮
HPLC是光、机、电、计算机四位一体的、技术密集的高科技产品,它的每一个部分都不允许受潮。否则,将会使有关的元器件损坏或性能变坏,影响仪器的稳定性。特别在我国的南方,春夏之交的时候,天气有时阴雨绵绵,连续很长时间。潮湿阴雨的气候条件很容易影响仪器的性能,尤其是光学系统。例如,检测器中的光栅是HPLC光学部分的核心元件,如果它受潮,就会使仪器的杂散光增大,进而使仪器的分析误差增大,同时使仪器分析的试样浓度变小。其他的光学元件受潮,也同样会引起仪器性能变坏。
如果HPLC的光学元件受潮,很有可能会发霉长毛;如果光学元件受潮后发霉长毛,就像人得了癌一样,是没有办法治(修复)的。因为,光学元件受潮后发霉长毛,就会使光能量损失很大,就会降低仪器的信噪比,降低仪器的灵敏度。同时,如上所述,光学元器件受潮,杂散光就会增大,也会加大仪器使用时的分析误差。
2.3要注意防止灰尘沾污光学元件
HPLC很多检测器是属于光学类的分析仪器(如UVD、FLD、ELSD、RID等),这些光学元器件很容易被灰尘沾污,光学元件一旦被沾污,就会引起很多的麻烦。与光学元件受潮的后果一样,主要是使光学元件的反射率降低,从而影响HPLC的灵敏度。另外,还会使杂散光增大,噪声增大,降低检测器的灵敏度,使分析测试的误差增大。因此,安放HPLC的房间要千净、通风、防尘,同时还要注意防止震动;否则,HPLC仪器工作时受到震动,会严重影响它的稳定性。一般来讲,安放HPLC的桌子最好采用水泥制作,它比较稳定,而且不容易受周围震动源的影响。
对环境要求很高的HPLC,例如美国Waters公司的UPLC等仪器,其价格昂贵(每台仪器要近10万美元)、技术指标很高。为保证其性能,还应在安放仪器的桌子下面挖坑、填放细砂防震,再在上面放安放仪器的桌子(或水泥台)。
3. HPLC的日常保养、维护
HPLC系统是精密仪器,因此使用者要认真注意日常保养和维护。除经常做好清洁卫生工作外,还要注意以下几点。
3.1 经常开机
如果仪器不经常使用,最好每星期开机1~2小时。这样做,一方面可以去潮湿,避免有些精密机械、光学元件和电子元件受潮;另一方面,还可以使各机械部件不会生锈,以保证仪器正常运转。
3.2经常校验仪器的技术指标
HPLC系统有许多关键技术指标,如噪声、检测限、稳定性和重复性(RSD)等。使用者对这些技术指标要经常定期检测(最好每一个季度检查一次,一般每半年检查一次,最少一年要检查一次),其检查方法和工具请参照本书的有关章节和附录。如果发现哪个技术指标有问题,用户不要轻举妄动,应该马上请制造厂的维修工程师来维修(特别是光学部分),以保证仪器始终工作在最佳状态,保证分析测试结果的可靠性。
一些使用者已经发现仪器出现了问题,但是还坚持让它带病工作。这样做,一方面仪器分析测试的数据不可靠;另一方面也容易进一步损坏仪器。
此外,HPLC应安装在太阳不能直接晒到的地方,以免“室光”太强,影响仪器的使用效果和使用寿命。还应该注意防止机械部件生锈。HPLC仪器有许多转动部件,如往复泵、检测器的光栅扫描机构、狭缝的传动机构、紫外检测器的氘灯和光源转换机构等。使用者对这些活动部件应该经常加一些钟表油,以保证其活动自如运转。有些部件使用者不易触及,可以请制造厂的维修工程师或有经验的科技人员帮助完成维护。
特别是当仪器较长时间不用的时候,更要注意防止机械部件生锈。可在仪器的转动部分适当涂一些黄油加以保护。
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