土壤中硒(Se)的测定方法常用的有原子吸收分光光度法、原子分光荧光法、分光光度法、催化极谱法、高效液相色谱法、中子活化法和原子荧光光度法(谢海涛2008，郑锋2007，韦山桃等2007)等。原子荧光光谱法具有设备简单、灵敏度高、光谱干扰少、工作曲线线性范围宽等优点。

1．方法原理

样品经酸溶液消解后，其中Se以硒酸(H₂SeO₄)形式存在。在盐酸介质中，将试样中的Se(Ⅳ)还原成Se(Ⅳ)，然后用硼氢化钾(KBH₄)作还原剂，将待测液中的四价Se还原成挥发性的硒化氢(SeH₂)，由载气(氩气)导入原子化器中进行原子化，在硒的特制空心阴极灯照射下，SeH₂分解成单质Se，基态se原子被激发至高能态，在去活化回到基态时发射出特征波长的荧光，其荧光强度与se含量成正比。被测元素的含量可从标准曲线或相关方程中求得。

2．仪器

原子荧光光谱仪，仪器最佳工作条件需要参照各仪器说明书并进行试验；硒特种空心阴极灯。

3．主要试剂

分析中使用的酸和标准物质均为符合国家标准或专业标准的优级纯试剂，其他为分析纯试剂和去离子水。

1)硒标准贮备液：准确称取元素Se(光谱纯)0.1000g，加10mL HNO₃，在沸水浴中加热溶解，并蒸去HNO₃，加入6 mol/L HCl 33 mL，用去离子水定容至1 000 mL。此溶液含Se为100 mg/L，酸度为0.2 mol/L。

或购买由国家认可的Se标准溶液。

2)硼氢化钾溶液：称取10g硼氢化钾(KBH₄)溶于先溶有2g KOH的200 mL溶液中，过滤，然后稀释至1L，现用现配。

3)浓盐酸(HCL)、浓硝酸(HNO₃)。

4)三价铁盐溶液：10 g/L，酸度为10%。HCL溶液。

4．操作步骤

1)标准曲线 用逐级稀释法稀释Se标准贮备液至含Se为100 ug/L,标准液，分别吸取稀释的Se标准溶液0.00、0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、10.0 mL于50 mL容量瓶中，加Fe³⁺盐溶液5 mL，加入6 moI/L HCl 19 mL，然后用纯水定容，摇匀，标准液含Se分别为0.00、1.00、2.00、4.00、8.00、10.00、20.00ug/L。在荧光光谱仪上测定荧光强度，以相对荧光强度为纵坐标，Se浓度为横坐标作曲线。

2)样品预处理称取过0.149 mm筛0.1000～0.5000 g土样(精确至0.0001)于25 mL 刻度试管中，加少量水湿润，然后加入盐酸-硝酸水-溶液(3：1：4)10 mL，在室温下放置过夜，再置于沸水浴中消煮2h，其间摇动二次，取下冷却至室温加Fe³⁺盐溶液2.5 mL,加入6 mol/L HCl 5mL，用水定容，放置澄清。同时做空白试验。

3)样品的测定取样品上清液与标准曲线同时测定荧光强度。

5．结果计算

式中，C(Se)为土壤Se浓度，ug/g或mg/kg；C₁为测得的Se的浓度，ug/L；V为测定时定容体积，mL；ts为分取倍数；W为样品重量，g；1000为将ml.转换成L的转换系数。

6．注意事项

1)试样酸度一般控制在10％～20％ HCI。

2)仪器测Se的检出限可达0.01 ug/L，不同仪器之间会有一定差异。

3)土壤中总硒测定的标准方法(原子荧光法)可参阅NY/T 1104-2006土壤中全硒测定。

4)土壤消化液中Cu、Ni等元素对Se测定可能会有干扰，一般可加Fe³⁺盐溶液去除Cu、Ni等元素的干扰。

相关链接：土壤中铅的测定