(一)土壤化学物质浸出毒性评价(水平振荡浸出方法)

1．浸出程序

(1)制样

将样品制成2 mm以下粒度的试样。根据土壤含水率情况，称取20～100g样品于预先干燥恒重的具盖容器中(注意容器的材料必须与废物不发生反应)，于105℃下烘干，恒重至±0.01g，计算含水率。进行水分测定后的样品，不得用于浸出毒性试验。

(2)仪器与材料

浸取容器，2L具密封塞广口聚乙烯瓶(当对大批量样品做浸出毒性试验时，可利用大的具密封塞比色管作为浸取容器)；浸取装置，频率可调的往复式水平振荡机；浸取剂，去离子水或同等纯度的蒸馏水；滤膜，0.45 um微孔滤膜或中速蓝带定量滤纸；过滤装置，加压过滤装置或真空过滤装置，对难过滤的废物也可采用离心分离装置。

(3)浸取条件

试样干基重量为100.0 g;固液比为1:10；振荡频率为(110±10)次/min，振幅为40 mm，振荡浸取时间为8h；静置时间为16h；试验温度为室温。

(4)操作步骤

1)称取干基试样100.0g，置于2 L浸取容器中，加入1L浸取剂，盖紧瓶盖后垂直固定于往复式水平振荡机上，调节频率为(110±10)次/min，在室温下振荡浸取8h，静置16h后取下，于预先安装好滤膜(或者滤纸)的过滤装置上过滤，收集全部滤出液，即为浸出液，摇匀后供分析用。如浸出液不能马上分析，则按GB/T 15555.1～15555.12-1995《固体废物浸出毒性测定方法》中的各个待分析污染物规定的保存方法进行保存。

2)如果样品的含水率大于等于91％时，则将样品直接过滤，收集其全部滤出液，供分析用。

3)如果样品的含水率较高但小于91％时，则在浸出试验时应根据样品中的含水量，补加与按规定的固液比计算所需浸取剂量相差的数量的浸取剂量后，再按程序进行提取。

(5)质量保证

每批样品(最多20个样品)至少做一个浸出空白。每批样品至少做一个加标回收样品。对每批滤膜均应做吸收或溶出待测物实验。在浸取过滤时，每个浸取容器中的液相部分必须全部通过过滤装置，并且必须收集全部滤出液，摇匀后供分析用。样品必须在保存期内完成浸出毒性试验和分析测定。做浸出试验的每批样品按照浸取程序做平行双样率不得低于20％。浸出空白、加标样品和平行双样测得结果不得大于方法规定的允许差。填写好浸出试验记录，保存全部质量控制数据，以备查阅或审查。

2．评价

该法适用于固体废物中无机污染物(氰化物、硫化物等不稳定污染物除外)的浸出毒性鉴别，可供事故性污染土壤毒性水平评价时参考。所谓浸出毒性，是指按规定的浸出程序，对固体废物进行浸出试验，浸出液中有一种或一种以上的化学物质浓度超过《危险废物鉴别标准浸出毒性鉴别》(GB 5085.3-1996)所规定的阈值(表12-8)，则该废物被确定为具有浸出毒性。

(二)植物毒性一种子发芽系数的测定

在微生物培养皿内垫上一张滤纸，均匀放入10粒水董(Lepid ium sativum)种子，加入土壤水浸提滤液5.0 mL，盖上盖子，在25℃黑暗的培养箱中培养48 h后，测定发芽率和根长。每个样品做3个重复，同时以去离子水作空白试验。然后用以下公式计算种子的发芽系数(Zucconi et al. 1981)：

表12-8  浸出毒性鉴别标准值(GB5085.3-1996)

若发芽系数＜100％，则具有植物毒性，该值越小毒性越强，通常以50％作为固体废物农用可接受的水平。

有些污染土壤对种子发芽可能无毒性，但可抑制植物生长，如重金属污染物，须经过作物盆栽实验来测定其对植物生长的影响，且需选用较敏感的植物。对植物产量的影响小于5％常被认为无明显的抑制作用。