抗原性未被破坏的转基因产品，也可以通过外源基因的表达蛋白进行检测。检测方法包括酶联免疫法、试纸法、蛋白印迹法、蛋白质试剂盒法等。在加工过程中蛋白质失活变性的转基因产品，如果使用这些技术检测则结果的可靠性、重现性将受到很大的制约。国家标准《转基因产品检测蛋白质检测方法》(GBIT 19495.8)适用于以检测目标蛋白为基础的转基因产品定性定量检测。下面对该方法做简要介绍。

1．原理从测试样品中按照一定的程序提取含有目标蛋白的基质，利用抗体与目标蛋白(抗原)特异性结合的特性，通过对偶联抗体与抗原体复合物的作用产生的信号进行检测，实现转基因产品特异蛋白质的检测。

2．分析步骤将原料样品粉碎后，加入缓冲液混匀，振荡抽提蛋白质，离心后取上清液稀释，加入偶联抗体孵育，在一定条件下使特异蛋白进行显色反应，测定其吸光度值。同时使用与基质一致的阳性标准品制作标准曲线。根据标准曲线计算相应外源蛋白浓度。每一轮反应应当包括空白、阴性标准品、阳性标准品和测试样品。

3．方法说明实验所用试剂应该是分子生物级的。酶联免疫法容易产生假阴性，不适合用于经过深加工的、抗原发生变性的转基因产品检测；样品中的酚复合物、脂肪酸、内源性磷脂酶等杂质可影响ELISA法的准确性和精确性，需要去除。样品使用聚丙烯管抽提，以免蛋白吸附。

其他检测方法

除PCR检测技术和蛋白质免疫检测技术外，检测食品转基因成分还有蛋白质组学分析、近红外光谱和质谱分析、变性高效液相色谱等方法。

1．蛋白质组学技术分析通过研究外源基因在同种或不同作物中的蛋白质差异性表达检测转基因产品。目前主要采用双向电泳-质谱技术(two-dimensional gelelectrophoresis,2DE/MS)及基于同位素标记的质谱分析技术进行蛋白质组学分析。前者是根据蛋白质等电点(PI)不同先在pH梯度胶中等电聚焦分离，然后利用分子量的不同在第二向中利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)进行电泳分离，再通过串联质谱(MS/MS)等方法测定。后者是对蛋白质进行质谱峰强度和蛋白质的肽段数分析定量，或者采用内标同位素法，精确定量蛋白质不同状态下的表达。蛋白质组学法不仅能鉴定差异表达的蛋白质，而且还能对其进行较为准确的定量。

2．近红外光谱分析法(NIR)该法利用波长在700～2500nm范围内的透射及反射光谱，对样品中有机分子的含氢基团进行定性和定量分析，从而区分转基因作物与非转基因作物。NIR分析不需对样品做预处理，即能实现农产品无损检测，并且具有快速、稳定、检测简便及反应指标多等优点。

3．变性高效液相色谱法(denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)又称核酸片段分析，其检测原理是基于异源双链DNA与同源双链DNA的解链特性不同，在部分变性条件下，异源双链因有错配区的存在而更易变性，在色谱柱中的保留时间比同源双链短，故先被洗脱下来，在色谱图中表现为双峰或多峰的洗脱曲线，从而实现转基因成分的检测。DHPLC只能鉴定是否存在转基因成分，不能检测转基因具体发生的位置及该区域的基因序列等信息。

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文章来源：《食品理化检验》

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