4.4.2 结果计算

如果吸收峰波长在326nm～329nm,且所测得各波长吸光度比值不超过1中规定值的±0.02,可用公式(1)计算含量：

式中：

X—克样品中含有维生素A的IU；

—百分吸收系数。

如果吸收峰波长在326nm～329nm,但所测得的各波长吸光度比值超过表1中规定值的±0.02,应按公式(2)求出校正后的吸光度，然后再计算含量。

A₃₂₈(校正)=3.52(2A₃₂₈-A₃₁₆-A₃₄₀)---------------(2)

式中：

A₃₂₈(校正)—在波长328nm处校正后的吸光度；

A₃₂₈—波长328nm处的吸光度；

A₃₁₆—在波长316nm处的吸光度；

A₃₄₀—在波长340nm处的吸光度。

如果校正吸光度与未校正吸光度相差不超过±3.0%,则不用校正吸光度，仍以未经校正的吸光度计算含量。

如果校正吸光度与未校正吸光度相差-15%至-3%,则以校正吸光度计算含量。

如果校正吸光度超过未校正吸光度的-15%或+3%之间，或者吸收峰波长不在326nm～329mn,则样品须按照《中华人民共和国药典》2005年版二部附录VnJ维生素A测定法项下第二法测定(4.4.3)。

两次平行测定的允许相对差在3%以内。

4.4.3 维生素A的测定第二法

精密称取实验室样品适量(约相当于维生素A总量500IU以上，质量不多于2g),置皂化瓶中，加30mL乙醇与3mL氢氧化钾溶液(500g/L),置水浴中煮沸回流30min,冷却后，自冷凝管顶端加水10mL冲洗冷凝管内部管壁，将皂化液移至分液漏斗中(分液漏斗活塞涂以甘油淀粉润滑剂)，皂化瓶用水60mL～100mL分数次洗涤，洗液并入分液漏斗中，用不含过氧化物的乙醚振摇提取4次，每次振摇约5min,第一次60mL,以后各次40mL,合并乙醚液，用水洗涤数次，每次约100mL,洗涤应缓缓旋动，避免乳化，直至水层遇酚酞指示液不再显红色，，乙醚液用铺有脱脂棉与无水硫酸钠的滤器滤过，滤器用乙醚洗涤，洗液与乙醚液合并，放入250mL容量瓶中，用乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取适量，置蒸发皿内，在水浴上低温蒸发至5mL后，置减压干燥器中，抽干，迅速加异丙醇溶解并定量稀释制成每ImL中含维生素A9～15IU,照紫外-可见分光光度法(《中华人民共和国药典》2005年版附录IV A)，在300nm、310nm、325与334nm四个波长处测定吸光度，并测定吸收峰的波长。吸收峰的波长应在323nm～327nm,且300nm波长处的吸光度与325nm波长处的吸光度的比值应不超过0.73,按下式计算校正吸光度；

A₃₂₅(校正)=6.815A₃₂₅-2.555A₃₁₀-4.260A₃₃₄

每1g实验室样品中含有的维生素A的单位=(325nm,校正)×1830

如果校正吸光度在未校正吸光度的100%±3%以内，则仍以未经校正的吸光度计算含量。

如果吸收峰的波长不在323nm～327nm,或300nm波长处的吸光度与325nm波长处的吸光度的比值超过0.73,则应自上述皂化后的乙醚提取液250mL中,另精密量取适量(相当于维生素A300～400IU))减压蒸去乙醚至约剩5mL,再在氮气流下吹干，立即精密加入3mL甲醇，溶解后，精密量取500uL,注入维生素D测定法(《中华人民共和国药典》2005年版附录Ⅶ K)第二法项下的净化用色谱柱系统，准确收集含有维生素A的流出液，在氮气流下吹干，而后按照上述方法自“迅速加异丙醇溶解”起，依法操作并计算含量。

注1：甘油淀粉润滑剂取甘油22g,加入可溶性淀粉9g,加热至140℃,保持30min并不断搅拌，放冷，即得。

注2：不含过氧化物的乙醚照麻醉乙醚项下的过氧化物检查，如不符合规定，可用5%硫代硫酸钠溶液振摇，静置，分取乙醚层，再用水振摇洗涤1次，重蒸，弃去首尾5%部分,馏出的乙醚再检查过氧化物，应符合规定。

5 酸值的测定

5.1 试剂和材料

5.1.1 乙醇。

5.1.2 乙醚。

5.1.3 氢氧化钠标准滴定溶液：c(NaOH)=0.1mol/L。

5.1.4 酚酞指示液：10g/L乙醇溶液。

5.2 分析步骤

分别取15mL乙醇和乙醚，置于锥形瓶中，加5滴酚酞指示液，滴加氢氧化钠标准滴定溶液(0.1mol/L)至微显粉红色，再加2.0g实验室样品，振摇使完全溶解，用氢氧化钠标准滴定溶液(0.1mol/L)滴定。

5.3 结果计算

酸值(以KOH计)w,数值以毫克每克(mg/g)表示，按公式(3)计算:

式中：

V—实验室样品消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)；

c—氢氧化钠标准滴定溶液实际浓度的数值，单位为摩尔每升(mol/L)；

m—实验室样品质量的数值，单位为克(g);

M—氢氧化钾的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)(M=56.1)。

6 过氧化值的测定

6.1 试剂和材料

6.1.1 冰乙酸。

6.1.2 三氯甲烷。

6.1.3 碘化钾溶液：取碘化钾适量，制成饱和溶液。

6.1.4 硫代硫酸钠标准滴定溶液：c(Na₂S₂O₃)=0.1mol/L,标定后稀释成0.01mol/L的浓度待用。

6.1.5 淀粉指示液：5g/L。

6.2 分析步骤

称取约1.0g实验室样品，精确至0.0002g。加30mL冰乙酸-三氯甲烷(6+4),振摇使溶解，加1mL碘化钾溶液，振摇1min,加100mL水与1mL淀粉指示液，用硫代硫酸钠标准滴定溶液(0.01mol/L)滴定，至紫蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正，消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液(0.01mol/L)不得超过1.5mL。

7 吸收系数比

在含量测定项下，实验室样品溶液在328nm处测定校正吸收值与直接吸收值之比不低于0.85。如果吸收峰在326nm〜329nm,且测得各吸光度比值不超过规定值的±0.02,不用计算吸收系数比。

相关链接：添加剂维生素A检验方法（一）

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(一)》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。