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中药有效成分的理化鉴别方法(一)

发布时间:2020-09-02 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2314

对于中药材所含的有效成分或指标成分,用微量、灵敏、可靠的理化方法进行定性(或定量)分析,确定它们的化合物类型,以判别药材的真伪优劣。由于中药材的化学成分比较复杂,所含成分多为混合物,且各类化学成分具有特定的结构和性质,在分析时常常相互干扰,通过一个反应的结果往往不易简单地做出结论,需要进行必要的对照试验等。对于样品溶液的制备要尽量排除杂质干扰,以利于反应的观察和判断,从而得出准确结果。

一、 生物碱

(一) 常用的生物碱沉淀试剂

有碘-碘化钾(Wagner试剂)、碘化铋钾(Dragendorff试剂)、碘化汞钾(Mayer试剂)、苦味酸(Hager试剂)、硅钨酸(Bertrand试剂)等。

(二) 供试品溶液的制备

称取样品粉末10g,加入10%盐酸乙醇溶液,在水浴上加热回流10分钟,趁热滤过,得酸性乙醇提取液,用5%氨水溶液调至中性,水浴上蒸干。残留物加5%硫酸(或加1%盐酸)使成酸性,滤过,滤液供作以下试验:

1. 碘化铋钾试验取滤液1ml,加碘化铋钾试液1~2滴,产生黄-橘红色沉淀。

2. 碘化汞钾试验取滤液1ml,加碘化汞钾试液1~2滴,产生类白色或黄色沉淀。

3. 硅钨酸试验取滤液1ml,加硅钨酸试液1~2滴,产生淡黄或灰白色沉淀。

4. 苦味酸试验取滤液1ml,加10%苦味酸水溶液1~2滴,产生黄色沉淀。

5. 鞣酸试验取滤液1ml,加10%鞣酸水溶液1~2滴,产生棕黄色沉淀。

改良碘化铋钾可与生物碱生成稳定的黄-橘红色沉淀,多数作薄层色谱鉴别用。

以上有三种试验产生阳性结果的表明有生物碱存在。凡是能产生有色沉淀的试剂也可以在薄层板上进行反应。

二、 黄酮类

(一) 黄酮类化合物的颜色反应

主要是利用分子中的酚羟基及γ-吡喃酮环的性质。黄酮类化合物可与盐酸-镁粉(或锌粉)、四氢硼钠(钾)、三氯化铝氢氧化钠等试剂产生特征性的颜色反应,用于黄酮类化合物的鉴别。

(二) 供试品溶夜的制备

称取样品粉末1g,加入甲醇10ml,水浴上回流10分钟,趁热滤过,滤液供作以下试验。

1. 盐酸-镁粉(或锌粉)反应取滤液1ml,加入盐酸4~5滴及少量镁粉(或锌粉),在水浴上加热3分钟,显红色或樱红色。

2. 荧光试验取滤液1ml,在沸水浴上蒸干,在有机酸或无机酸存在条件下,加入硼酸的饱和丙酮溶液,产生亮黄色;若有机酸为草酸,产生绿色荧光;若有机酸为10%枸橼酸丙酮溶液,则只显黄色而无荧光。

3. 三氯化铝反应取滤液滴于滤纸上,先在紫外光灯下观察荧光,然后加1%三氯化铝乙醇溶液反应,生成的络合物多呈黄绿色,置紫外灯下显鲜黄色荧光。

4. 碱液试验取滤液滴于滤纸上,干燥后喷洒1%碳酸钠水溶液或暴露于氨蒸气中,显亮黄或橙黄色。如将仅用氨蒸气熏过的滤纸暴露于空气中,颜色渐渐褪去而变为原有的颜色;但经碳酸钠水溶液处理而呈现的颜色置空气中却不褪色。

三、糖、多糖及其糖苷类

供试品溶液的制备:称取样品粉末5g,加水50ml,在50~60℃水浴中加热1小时,滤过,滤液供作以下试验。

(一) 斐林(Fehling)试验

取滤液1ml,加碱性酒石酸铜试液(Fehling试液)1ml,在沸水浴上加热数分钟,产生砖红色氧化亚铜沉淀,表明可能含有还原糖。
另取滤液1ml,加盐酸调至酸性,加热微沸数分钟,冷却后以碳酸钠调节pH至中性,重复上述斐林反应。

如溶液在水解前呈负反应,水解后呈正反应或水解后产生氧化亚铜砖红色沉淀较水解前多,表明含有低聚糖、多糖或糖苷。

(二) α-萘酚(Molisch)试验

取滤液1ml,加入5% α-萘酚乙醇溶液1~3滴,摇匀。沿管壁缓缓加入0.5ml浓硫酸,如在两液交界面处,有紫色环,表明含有糖、多糖或苷类。

(三) 多糖的试验

取滤液5ml,在水浴上蒸发至1ml,加入乙醇2ml,如出现沉淀,滤过,并用少量乙醇洗涤。将沉淀溶解在2ml水中,按上述斐林试验方法检查样品在水解前后的还原反应,以鉴定多糖的存在。

相关链接:中药材主要有效成分—— 氨基酸和蛋白质

 

 

文章来源:《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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