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定性分析,一般可采用普通的毛细管或微量注射器手丁点样,但定量分析,必须采用定容玻璃毛细管或铂铱合金定容毛细管或专用注射器式微量点样器。
1.点状点样
借助毛细管作用吸样的定容管有两种:一种是容积为0.5—5txl的定量毛细管;另一种是100nl及200nl的铂铱合金定量毛细管。注射器式的可变体积的点样器有50~230nL的毫微点样器,0.5~2.3txl的微量点样器,及可精确定量的5~100pl微量注射器。
注射器式的毫微点样器、微量点样器及微量注射器可由测微尺控制,也可与手动点样装置配合使用。
电动点样装置完全适用于上述各种点样器的配套使用,并可自动控制点样次数、点样器在薄层上的停留时间以及点样器接触薄层的速度。
2.带状点样
当样品溶液浓度较稀,点样体积较大而要进行定量点样时,可采用半自动点样器,这是非接触喷雾式的装置,定量分析点样体积范围为l~99gl,制备型点样体积,利用设备内装的微处理器编序操作,自动计算每块板可用的样品道数目(也可点状点样)。点样时用氮气将注射器针尖溶液吹落在薄层板上,薄层板在针头上定速移动,并可重迭喷样。
3.自动点样
现代自动点样仪可由电脑控制吸样、点样、清洗等全过程,可进行点状、带状及方形点样。点状点样时为接触式点样,带状、方形点样时为喷雾式点样,可选配加热附件,可放几十个样品瓶或几十孔点滴板,点样量为lOnI.~50pJ,点样参数可与扫描仪的扫描软件联用,达到高度自动化。
4.其它点样方式
除了上述点样方式外,还有热微量抽出法、热分级法和超临界流体法等。
通常TLC所用样品体积为1~5m3而当使用极性较强的点样溶剂时,HPLC用l00nL.加样体积,较弱极性溶剂用200ml。最佳样品量不可超过l0ng。
在HPLC中,原始样品斑点直径小于1mm,展开后直径为2mm。TLc中斑点直径开始为3~6mm,展开后增至6~15mm。小斑点产生好的分离和展开效果。当不使用有惰性预吸附面积或浓缩区域的板时,点样模扳有助于点样位置的重现。
高性能板包含2cm宽的惰性点样带(浓缩区域),该区域由沿板低边涂覆纯化硅藻土构成。使用这些板进行TLC分析,不需要特殊的点样设备或复杂的点样技术。在原始样品点加到常规薄层板后,用极性溶剂预展开l~2cm距离,可以达到相似的效果。
干燥后,用适当的极性较弱的溶剂继续展开l0cm的距离。
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