4 高效液相色谱法

4.1 方法提要

将试样与问硝基酚溶液(内标)混合，在室温下待丁二烯蒸发后，残余溶液经反相高效液相色谓分离和紫外检测器(波长280nmn)检测，测量物质的色谱峰面积或峰高，以内标法测定TBC的含量。

4.2 试剂与材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的二级水要求。

4.2.1 甲醇，HPLC级。

4.2.2 氯仿。

4.2.3 TBC[即4-(1，1二甲基乙基)-1，2-苯二酚]，25g/L氯仿溶液。

4.2.4 间硝基酚，25mg/L水溶液。

4.2.5 乙酸。

4.3 仪器

4.3.1 微量注射器：容积为10uL，25uL，50uL和100uL。

4.3.2 高效液相色谱仪：所用的高效液相色谱仪应符合下列要求，且在检测波长处对浓度为10mg/L TBC所产生的峰高应至少为噪声水平的两倍。

4.3.2.1 输液泉：高压平流泵，其流量范围一般为0.1mL/min～9.9mL/min，工作压力一般为0MPa～40MPa，压力脉动应小于±1%。

4.3.2.2 进样装置：配有20pL定量管的高效液相色谱手动进样阀或自动进样装置。

4.3.2.3 检测器：紫外(UV)检测器，检测波长为280nm

4.3.3 色谱柱：不锈钢材质，长150mm，内径4.6mm。固定相为十八烷基化学键合相型硅胶，粒度为5um。或者能满足分离和定量的其他规格色谱柱。

4.3.4 流动相：V(甲醇)：V(水)：V(乙酸)=67：32：1(体积比)，流量为1.0mL/min～1.5mL/min。

4.3.5 一般实验室仪器和设备。

4.4分析步骤

4.4.1校准曲线的绘制

4.4.1.1配制标准溶液

在6个50mL具塞锥形烧瓶中分别加入25.0mL间硝基酚溶液(4.2.4)，然后用注射器按表4所示体积逐个加入相应量的TBC标准溶液(4.2.3)，摇匀。

表4 TBC标准溶液体积与浓度对应表

4.4.1.2 校准

用注射器将上述配制的标准溶液逐一充满进样阀的样品定量管，并注入色谱仪,记录所得到的TBC和间硝基酚的色谱峰面积(或峰高)。

4.4.1.3 绘制校准曲线

以TBC浓度(mg/L)为横坐标，以TBC-间硝基酚的峰面积(或峰高)比值为纵坐标，绘制校准曲线。

4.4.2 试验溶液的准备

将长1m，内径3mm的不锈钢盘管和容量为25mL的玻璃量筒冷却至-20℃左右，将盘管与试样钢瓶相连，通过盘管使液态丁二烯流入量筒约25mL左右，准确读取试样体积。测量试样温度，精确至1℃。然后将此试样倒入已盛有25mL间硝基酚的50mL具塞锥形瓶中，室温下使丁二烯自然挥发。塞上瓶塞，摇匀1min。

上述操作应在通风橱中进行，应远离明火，并将钢瓶接地，以防止因静电可能产生的爆炸危险。

相关链接：工业用丁二烯中特丁基邻苯二酚(TBC)的测定（二）

文章来源：《化学工业标准汇编有机化工方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。