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4.1.3最大允许残留限量
在动物饲养过程中,过去的几十年,CAP和TAP在兽医临床抗感染治疗中发挥了举足轻重的作用,但由于CAP存在严重的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症等疾病,随着公众对其潜在毒性、残留和耐药性的广泛关注,近些年来,包括中国在内的许多国家陆续禁止了它在兽医临床上的使用。TAP血液系统毒性不及氯霉素,但免疫抑制作用比CAP强,现除我国与日本外,欧共体和美国均禁用于食品动物。取而代之的是新型氯霉素类抗生素—FF。自20世纪90年代以来,FF已开始逐渐在全球范围内使用。目前国内商品名有氟苯尼考、氟尔康、安达灵等,剂型有注射剂、粉剂、饮水剂、预混剂等。目前一些主要国家和组织规定的最大允许残留限量(maximum residue limit,MRL)见表4-2。
表4-2 主要国家和组织制定 的CAPs的MRLs
4.1.4残留分析技术
4.1.4.1前处理方法
动物组织中含有大量蛋白质、脂肪、糖类、维生素、无机盐、水分等,这些样品基质的存在不但干扰待测物的检测,而且污染仪器和降低设备使用寿命,因此需要选择合理有效的前处理方法,降低动物基质成分对CAPs残留分析的影响。
(1)水解方法
CAP在动物的肝、肾、血液中有超过50%以轭合物的形式存在,对葡萄糖醛酸轭合物可加入β-葡萄糖醛酸酶处理样品。另外,组织中还有与蛋白结合的药物,可用酸或二硫苏糖醇水解后测定。
Kaufmann等采用β-葡萄糖苷酸酶水解肾脏组织中葡萄糖醛酸轭合的CAP,经固相萃取净化后,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定。方法检测限(CCa)为0.011ug/kg。Ashwin等用β-葡萄糖苷酸酶水解猪肾中葡萄糖醛酸轭合的CAP,经提取净化后用LC-MS/MS测定。方法CCa为0.1ug/kg,检测能力(CCa)为0.2ug/kg。Aresta等也采用β-葡萄糖苷酸酶水解尿液中轭合的CAP。Gantverg等测定动物肌肉组织和尿液中的CAP。肌肉组织用二硫苏糖醇释放蛋白结合药物,再用乙酸乙酯提取;尿液则用磷酸缓冲液稀释后,加-葡萄糖苷酸酶水解轭合药物,再用乙酸乙酯提取,经C18固相萃取柱净化后,用LC-MS/MS测定。该方法回收率大于80%,相对标准偏差(RSD)为13.4%~29.2%,检出限(LOD)为0.02ug/kg。
(2)提取方法
CAPs提取方法主要有常规的液液萃取(LLE),并可结合超声波辅助提取(UAE)、微波辅助提取(MAE)等手段来保证萃取效率。另外,超临界流体萃取(SFE)、固相微萃取(SPME)和分散液液微萃取(DLLME)作为新的高效低污染提取技术,近年来也在CAPs的分析中得到应用。
相关链接:氯霉素类药代谢和毒理学
文章来源:《兽药多组分残留分析技术》
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