琥珀酰基化麦芽凝集素（sWGA）已经作为常用方法来检测O-Gl-cNAc。然而，sWGA能识别任何末端的β-GlcNAc残基，所以蛋白样品需要用PNGase F处理，以去除N-连接糖基，而且还需要进一步检测这种活性是否与单糖或更长的O-连接多聚糖有关。

(1）材料

1）TBST; 10mmol/L Tris·HCl, pH 7.5；150mmol/L NaCl;0.05%（V/V) Tween 20。

2）封闭液：3% (W/V) BSA溶于TBST。

3）TBS; 10mmol/L Tris·HCl, pH 7. 5；150mmol/L NaCl。

4）高盐TBST（HS-TBST)：10mmo1/L Tris·HCl, pH 7.5；1 mol/L NaCl；0.05%（V/V) Tween 20。

5）0. 1 μg/ml sWGA-HRP（EY Labs，San Mateo, CA)溶于TBST。

6) 1. 0mol/L G1cNAc，溶于HS-TBST。

7）ECL（Amersham Biosciences )。

(2）方法

1) 蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS - PAGE）电泳分离后，转印至PVDF或硝酸纤维素（NC）膜。

2) TBST [ 3 %BSA (W/V )］洗膜（两次） l 0min。

3) TBST [ 3 %BSA (W/V )］中室温封闭60min 。

4）TBST洗膜3×10min。

5 ) 0. 1 μg/ml SWGA-HRP（溶于TBST，设加1 mol/L GlcNAc与不加1 mol/L GlcNAc组），4℃过夜。

6) HS-TBST洗膜6 ×10min。

7) TBS洗膜1×10min。

8）发光。