苯胺类化合物微溶于水，易溶于乙醇、乙醚及丙酮。当暴露于空气中，可氧化而使色泽变深。在这类化合物中，苯胺是常用于染料制造、印染、橡胶、制药、塑料和油漆等的原料。苯胺可通过呼吸道、消化道摄入人体，亦可通过皮肤吸收进入人体。苯胺对人体具有一定毒害作用，主要是使氧和血红蛋白变为高铁血红蛋白，影响组织细胞供氧而造成内窒息。慢性中毒表现为神经系统症状和血象的变化，某些苯胺类化合物还具有致癌性。采用偶氮比色法测定工业废水中苯胺类化合物，具有方法简便、试剂稳定、精密度和准确度好的优点。水样应采集于玻璃瓶内，并在采集后24h以内进行测定。

1．方法原理

苯胺类化合物在酸性条件下与亚硝酸盐重氮化，再与盐酸萘乙二胺偶合，生成紫红色染料，根据波长在545nm处的吸收进行定量。以苯胺为例，反应式如下：

2．干扰

在酸性条件下测定，当酚含量高于200mg/L时，对本方法有正干扰。

3．方法的适用范围

本方法适用于测定受芳香族伯胺类化合物污染的地表水，染料、制药等行业的工业废水。试样体积为25m1使用光程为l0mm的比色皿，本方法的检出浓度为0.03mg/L（吸光度A=0.010所对应的苯胺浓度）。测定上限为50mg/L。

4．仪器

①分光光度计。

② 25ml具塞比色管。

5．试剂

①硫酸氢钾。

②无水碳酸钠。

③精密pH试纸：pH0.5-5.0。

④5％亚硝酸钠水溶液，称取5g亚硝酸钠，溶于少量水中，稀释至100m1（应配少量，贮存于棕色瓶中，置冰箱内保存）。

⑤ 2.5%氨基磺酸按水溶液。

⑥.05mol/L硫酸溶液。

(7)2%N-（1-萘基）乙二胺盐酸盐（N-（1-Naphthyl）-ethylendiamine-dihydrochloride,简称NEDA）水溶液。

⑧苯胺标准贮备溶液：于25ml容量瓶中加入 0.05mol/L硫酸溶液l0ml，称量（准确至0.lmg)，然后加入3-5滴苯胺（再一次称量）。用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀。计算出每毫升溶液中所含苯胺的量，作为贮备液于冰箱内保存。

⑨苯胺标准使用溶液：用0.05mol/L硫酸溶液稀释成每毫升含10.0μg苯胺的标准使用溶液（用时现配）。

注：①苯胺应为无色透明的液体，如色泽变黄应重新蒸馏后使用。

②萘乙二胺盐酸盐的配制：用颜色很浅的二级品，可直接配制，保存于冰箱中可稳定较长时间。配制时在水浴上温热至溶液清亮并全部溶解，过滤后稀释至所要体积。贮存于棕色玻璃瓶中，冰箱保存。此溶液不宜多配，当溶液浑浊时应重新配制。

6．步骤

(1)校准曲线的绘制

于七个25ml具塞比色管中，分别加入0、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00ml苯胺标准使用溶液，各加水至l0ml，摇匀。加0.6m1 10％硫酸氢钾溶液调节pH至1.5-2.0（用精密pH试纸测试），加1滴5％亚硝酸钠溶液，摇匀，放置3min。加入2.5%氨基磺酸铵溶液0.5ml，充分振荡后，放置3min。待气泡除尽，加入2%NEDA溶液10ml，用水稀释至刻度，摇匀，放置30min。于545nm波长处，用l0mm比色皿，以水为参比测定吸光度。以苯酚含量（μg）对应空白校正吸光度绘制校准曲线。

(2）样品的测定

①水样用中速滤纸过滤后，吸取滤液适量（含苯胺0.5-30 ug）于25ml具塞比色管中，加水稀释至l0ml，按步骤（1)进行操作。

②以蒸馏水代替水样，按相同操作步骤进行空白试验。由水样吸光度减去空白试验吸光度的差值（空白校正吸光度），从校准曲线上查出相应的苯胺含量。

7．计算

苯胺类（以苯胺计，mg/L) =m/V

式中：m——由校准曲线查得的苯胺量（μg )；

V－一水样体积（ml)。

8．精密度和准确度

以制药废水为统一样品（加浓H2SO；调至pHl -2保存），经九个实验室分析，当浓度为0.lmg/L时获得室内相对标准偏差为2.7%, 0.5mg/L时为1.6%, 0.9mg/L时为1.6%;室间相对标准偏差小于2.4%;测定值的相对误差小于0.2%.

9．注意事项

①显色温度对反应有影响，最佳反应温度在22-30℃，若室温高于或低于此温度范围，可在恒温水浴中显色，或采用同时绘制校准曲线的办法进行测定。保存在冰箱的水样及试剂，比色前一定放置到室温，以消除温度的影响。

②色度较深的废水，可分取与显色相同体积的水样，按同样的操作步骤，但免去加lml2%NEDA溶液步骤，测量其吸光度。由水样吸光度减去上述所测得的吸光度的差值，查出相应的苯胺含量。

③对色泽很深或含酚量较高的水样，测定苯胺时，可采用蒸馏法以消除干扰。蒸馏操作步骤为：分取l00ml水样于蒸馏瓶中，用4%氢氧化钠溶液调至碱性，加热蒸馏。待蒸出80m1时，停止加热，稍冷后，往蒸馏瓶中加入20ml水，继续蒸馏至l00ml馏出液为止。