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微生物样品采集与保存

发布时间:2017-03-09 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:2067

一、土壤微生物的采集方法

1.布点数量

土壤监测的布点数量要根据调查目的、调查精度和调查区域环境状况等因素确定。一般要求每个监测单元最少应设3个点。

2.布点原则与方法

应坚持哪里有污染就在哪里布点。

3.土壤样品采集方法(混合采集方法)

对角线法、梅花点法、棋盘式法、蛇形法。

4.采样深度及采样量

种植一般农作物每个分点处采0~20 cm耕作层土壤。

种植果林类农作物每个分点处采0~60 cm耕作层土壤。

了解污染物在土壤中垂直分布时,按土壤发生层次采土壤剖面样。

各分点混匀后取lkg,多余部分用四分法弃去。

二、水中微生物的采集方法

1.自来水的采集

先将水龙头打开至最大,放水约3-5 min,然后关闭水龙头,用酒精灯火焰将水龙头烧灼3-5 min灭菌,或用70%酒精消毒水龙头,再打开水龙头,放水1 min后,以排出管道内的存水,再用无菌的容器接取水样。如果水样中含余氯,则采样瓶在灭菌前应加入硫代硫酸钠溶液(每500 ml水样加3%硫代硫酸钠溶液1ml),以消除余氯的影响,避免其继续存在产生杀菌作用。

2.河湖水、井水、海水和其他水样的采集

如采集的是表层水,可握住瓶子下部,直接将灭菌的带玻璃塞瓶插入距水面10~15 cm的深层处,除去玻璃塞,瓶口朝水流方向,使水样灌入瓶内后将瓶塞盖好,将瓶从水中取出待测。

如果采集的是一定深度的水样时,可使用特制的采样器,采样器外部是一金属框,内装玻璃瓶,器底有沉坠,可按需要坠入一定的深度,瓶盖系有绳索,控制瓶盖启闭,拉起绳索即打开瓶盖装水,松放绳索即自行盖上。采样前应对玻璃瓶作灭菌处理。采样时将采样器下沉到预定深度,扯动挂绳,打开瓶塞,待水灌满后,迅速提出水面,弃去上层水样,盖好瓶盖。在取水时应同步测定取水的深度。水样采集后,将水瓶迅速送回实验室进行检验。

三、水样的保存及送检

1.水样的采集

采集的水样,除一部分在现场测定外,其中大部分要送到指定实验室进行分析测试。在运输和实验室管理的过程中,为继续保证水样的完整性、代表性、免遭污染、破坏和丢失,必须遵守各项安全措施。应注意以下几点:根据采样记录和样品登记表清点样品,严防差错。塑料容器要塞紧内塞,旋紧外盖。玻璃瓶塞紧磨口塞,用细绳将瓶塞与瓶颈拴紧;或用实验室用透明胶带,或用封口胶、石蜡封口。测油类水样不能用石蜡封口,为防止样品在运输过程中因震动、碰撞而导致沾污,最好将样品装箱运送。需冷藏的样品,应配广口隔热瓶,加入冰块,样品置于其中保存。冬季采取保温设施,以防冻裂样品瓶。而夏季应防止温度高时瓶盖冲起。

2.水样的保存方法—冷藏法

水样在4℃保存,最好放在暗处或冰箱中,这样可控制生物活动,减缓物理作用和化学作用的速度。这种方法对以后的分析测定没有妨碍。

3.水样的处置

取样时要注明日期、温度、水的来源、环境状况、水的用途等,以供水质评价时参考。采集的水样最好立即检验,一般从取样到检验不宜超过2h,如不能立即检验,可在1~5℃下冰箱存放,但较清洁的水样应在12h内测定,污水则必须在6h内测定完毕。若无法在规定时间内完成,则应考虑采用延迟培养法,或者在报告中注明水样采集与测定的间隔时间。

四、空气微生物的采集方法

1.沉降法

制备好无菌平板,在待测点打开皿盖暴露于空气5~10 min,盖好皿盖置于37℃培养箱中培养48 h,取出计算菌落数。计算公式如下:

C=1 000×50 N/At

式中:C—空气细菌数,个/m3;

N—菌落数,个;

A—平皿底面积,cm 2 ;

t—暴露时间,min。

2.撞击法

撞击法是采用撞击式空气微生物采样器采样,通过抽气动力作用,使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流,使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上。经37℃. 48h培养后,计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。

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