肿瘤由原发部位播散到远隔器官的过程称为肿瘤转移，这是肿瘤恶性本质的表现。由于转移过程涉及原发器官和远隔器官，因此肿瘤的转移特性需要应用实验动物模型进行体内实验来研究。选择具有高转移性的肿瘤细胞系是建立稳定的肿瘤转移模型的前提，肿瘤细胞的体外培养在建立肿瘤转移模型中也是必不可少的。

一、筛选具有高转移性的肿瘤细胞系

体内接种肿瘤细胞实验在实验动物体内反复接种肿瘤细胞并选出具有不同移植能力的肿瘤细胞亚群。亦可在体外培养条件下，选出可能与转移密切相关的、具有某种生物学特性的肿瘤细胞亚群，例如具有强侵袭能力、易黏附能力以及各种抗宿主免疫防御能力等，另外也可利用基因克隆技术，建立肿瘤细胞株、选择克隆形成率高的肿瘤细胞株，移植于动物体内诱发转移灶，取转移灶肿瘤组织，在体外分离出具有高转移特性的肿瘤细胞株并研究其转移生物学特征。这里简要介绍动物体内接种法筛选高转移性的肿瘤细胞系。

【材料】

实验动物常用小鼠，无菌器械，细胞培养相关试剂等。

【方法】

(1)在动物皮下接种新鲜肿瘤组织块或肿瘤细胞系（约10⁶～10⁷个细胞），待出现较大肿块后，无菌切除肿瘤，剪碎成1 mm³大小，再移植到其他动物皮下。如此可以将肿瘤在动物体内反复传代，并可能诱发自发转移灶。

(2)取新鲜肿瘤标本或肿瘤细胞系，制成单细胞悬液，从小鼠尾静脉、眼球后静脉丛或门静脉注入（约5x10⁶个细胞），诱发实验性转移灶。

(3）根据肿瘤的组织类型，将适量的瘤细胞接种于动物相应的器官组织，如颅内原位移植脑瘤和肝原位移植肝癌等。

二、肿瘤转移模型的建立

1．小鼠黑色素瘤肺转移模型的建立

【材料】

（1)黑色素瘤细胞株B16-F10及其体外培养体系。

(2) C57BL/6小鼠。

（3）细胞培养板、注射器等耗材。

【方法】

（1)细胞株B16-F10常规体外培养。

(2) B16-FIO细胞输入C57BL/6小鼠：对数期生长的B16-F10细胞（传代后24小时之内的细胞），尾静脉注射C57BL/6小鼠,1x10⁶个细胞／只。

(3）接种3天后进行分组可用于某些药物治疗效果的评估。一般每隔1天给药1次，共6次。最后1次给药结束24小时后处死小鼠，计数各实验组动物肺部肿瘤结节数后，并于-80℃的条件下保存肺组织。

【注意事项】

建立模型时会出现以下情况：

(1)单向转移模型：即单纯淋巴道转移或肺转移或特异器官转移模型。这是人们所希望的理想模型，国内外已建立不少这类模型。

(2)双向或多向转移模型：在所建立模型中往往有淋巴道转移为主合并肺转移；或肺转移合并淋巴道转移，也有少数淋巴道或肺转移合并肝转移以及其他器官转移。

(3)多数转移模型用同种同系来源的动物肿瘤建立。

2．高转移模型的建立

(1)在建立可移植性肿瘤模型时若发现有高血道或淋巴道转移特性时，再进行重复移植和鉴定其属于哪一种类型，进行建立模型的实验设计，确定其转移途径，出现转移时间、转移率等标准的研究。

(2)在建立移植瘤模型过程中常常发现有双向转移的模型：如小鼠子宫颈癌U14肺转移为80%，淋巴转移为95%；人肺巨细胞癌淋巴转移为96.7%，肺转移为86.7%。若将这些转移瘤株进行体内和体外结合的转移性癌细胞筛选系统，进行肺转移及淋巴转移灶进行单向筛选也会选出单向转移的模型。

(3)在建立移植瘤模型过程中，发现有低转移率的瘤株，可进行提高转移率的筛选。

3．目前国内肿瘤转移模型中存在问题国内有多种单向肺转移和淋巴道转移模型及淋巴转移合并肺转移的双向转移模型。但缺乏特异器官性转移模型，如特异性肝转移，肾转移，卵巢转移等模型，尚需建立这类转移模型；如何评估转移模型稳定性问题，尚待统一认识和验证。