一、概述

β受体激动剂类药物具有苯乙醇胺结构母核，为苯乙醇胺类物质，按照苯环上取代基的不同，可分为苯胺型(如克伦特罗，clenbuterol)和苯酚型(如沙丁胺醇，salbutamol；莱克多巴胺，ractopamine)，而苯酚型β受体激动剂又分为苯二酚型(如特布他林，terbutaline)。几种主要β受体激动剂的结构式见表8-7。该类化合物能够改变动物体内的代谢途径，具有明显的促生长、提高瘦肉率及减少脂肪的效果。20世纪80年代初美国某公司意外发现盐酸克伦特罗的这种效果，并被用于养殖业，其商品名称为“瘦肉精”。这类药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂，主要用作平喘剂，一次性过量摄入，会出现急性中毒反应。长期低剂量食用，可致染色体畸变，诱发恶性肿瘤等。因此，多种β受体激动剂被列为禁止使用的饲料添加剂，在动物性食品中不得检出。

表8-7 几种常见β-受体激动剂的结构式

上述β受体激动剂均为白色或类白色的结晶性粉末，无臭，味苦；熔点在119～167℃。溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。化学性质稳定，一般烹调方法不能将其破坏，加热至172℃时才分解。

二、食品中β受体激动剂类兽药残留检验

β受体激动剂类药物的检验方法有HPLC法、GC-MS/MS法、LC-MS/MS法和ELISA法。本章介绍GC-MS多残留同时测定的方法(农业部1031号公告-3)。

1.原理食品样品中呈结合态的β-受体激动剂类药物，在乙酸胺缓冲溶液中经酶解后呈游离状态，调节pH,用乙酸乙酯-异丙醇混合溶剂萃取，萃取液旋转蒸干，用乙酸胺缓冲溶液溶解，过阳离子交换柱，样液用氮气吹干，用双二甲基硅基三氟乙酰胺(BSTFA)衍生后，采用离子交换模式进行GC/MS分析，内标法定量。

2．分析步骤

(1)样品制备：取适量新鲜或冷冻猪肝样品，绞碎、混匀，-20℃冰箱中储存备用。

(2)提取：称取匀质猪肝样品(猪尿样品用乙酸调节pH 5.2 )，加入乙酸铵溶液，匀质，加入β-葡萄糖醛酸苷酶溶液和美托洛尔内标工作液，密闭，在60℃酶解2小时，离心，取上清液，在残渣中加入乙酸铵溶液，匀质，离心，合并提取液，调节pH 9.5±0.2，再离心，取上清液，加入一定量氯化钠，振荡，待净化处理。

(3)净化：在样品提取液中加入乙酸乙酯-异丙醇混合溶剂萃取，离心后吸取上清液，重复萃取一次，合并萃取液，在60℃水浴中旋转浓缩至干，加入乙酸铵溶液待固相萃取净化。

将上述样液转移到已依次用甲醇、水和30mmol/L的盐酸活化的阳离子交换柱上，然后用甲醇和水淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱，再用4%氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，在50℃水浴中用氮气吹干。

(4)衍生化：在净化吹干的样品中加入准确量的甲苯和衍生化试剂BSTFA，振荡混合后，密闭，在80℃衍生化60分钟，冷却后进行GC-MS分析。

(5)标准工作曲线制备：采用空白样品中添加标准工作液的方法制备标准工作曲线，每个浓度点做3个平行样，用平均值绘制标准曲线。

(6)测定：HP-5MS石英毛细管色谱柱，(30m×0.25mm, 0.25um)或相当者。载气为高纯He；恒流0.9mL/min；进样口温度，220℃；不分流进样；进样体积：1ul；程序升温，起始温度70℃(保持0.6min)，以25℃/min的升温速率升至200℃(保持4分钟)，再以15℃/min的升温速率升至280℃(保持5分钟)。

GC/MS传输线温度：280℃；溶剂延迟，7分钟；EM电压，高于调谐电压200V ;离子源(El)温度，200℃；四级杆温度，160℃；选择离子监测，(m/z)86,277,296,311(马布特罗);86,212,262,277(盐酸克伦特罗);86,350,369,440(沙丁胺醇);72,223(美托洛尔内标);86,277,333,352(班布特罗);163,234,250,502(莱克多巴胺)。

定性：样品峰与标样的保留时间之差小于2秒，人工比较选择离子的丰度。其中，试样峰的选择离子相对强度(与基峰的比例)不超过标准相应选择离子相对强度平均值的±20%(标样中选择离子峰与基峰的强度比大于10%)或±50%(标样中选择离子峰与基峰的强度比小于10%)。

定量方法：选择定量离子马布特罗(m/z86),盐酸克伦特罗(m/z86)、沙丁胺醇(m/z369)、班布特罗(m/z 86)和莱克多巴胺(m/z 250)与内标离子(m/z 72)的峰面积比进行单点或多点校准定量。

空白试验：除不加样品外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。

3．方法说明

(1)本方法检测限：盐酸克伦特罗、沙丁胺醇和班布特罗为1 ug/kg(或ug/L)，马布特罗和莱克多巴胺为2.0ug/kg(或ug/L)。

(2)本法采用了β葡萄糖醛酸苷酶是细胞溶酶体酶解样品中各种有机体，适当加热可加速残留兽药的溶出，缩短提取时间。

(3)经净化处理再进行衍生化，可防止具有相同官能团的杂质干扰测定。

相关链接：硝基呋喃类兽药残留检验

文章来源：《食品理化检验》

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