6 试样的制备与保存

6.1 试样的制备

将牛奶从冰箱中取出，放置至室温，摇匀，备用。

6.2 试样保存

牛奶置于4℃冰箱中避光保存，奶粉常温避光保存。

7 测定步骤

7.1 提取

7.1.1 牛奶

称取2g试样，精确到0.01g，置于50 mL具塞塑料离心管中，加入10 mL乙腈，于涡旋振荡器振荡提取1 min,5000r/min离心5 min，上清液过滤到鸡心瓶中，在残渣中加入5 mL磷酸盐缓冲溶液(4.8),10mL乙腈，重复以上步骤，合并上清液，于50℃旋转蒸发，至乙腈全部蒸出。加入5 mL磷酸盐缓冲溶液，混匀。

7.1.2 奶粉

称取0.5 g试样，精确到0.01g，置于50 mL具塞塑料离心管中，加入6 mL磷酸盐缓冲溶液(4.8),涡旋混匀，再加入10 mL乙腈，于涡旋振荡器振荡提取1 min, 5000 r/min离心5 min，上清液过滤到鸡心瓶中，在残渣中加入5 mL磷酸盐缓冲溶液，10 mL乙腈，重复以上步骤，合并上清液，于50℃旋转蒸发，至乙腈全部蒸出。加入5 mL磷酸盐缓冲溶液，混匀。

7.2 净化

将7.1的样液转移到贮液器中，再用5 mL磷酸盐缓冲溶液洗鸡心瓶，洗液合并到贮液器，以约1 mL/min的流速全部过HLB固相萃取小柱(4.17)，待样液完全流出后，先后以4 mL水、4 mL 25％甲醇水溶液淋洗，抽干，用4mL 5%氨水甲醇溶液(4.9)洗脱于10 mL具刻度离心管中，洗脱液于50℃，氮气吹至约0.2 mL时停止浓缩，用甲醇-甲酸溶液(4.12)定容至1 mL, 5000r/min离心5 min，过0.2um滤膜，供液相色谱串联质谱分析。

7.3 空白基质溶液的制备

将取牛奶阴性样品2g，奶粉阴性样品0.5g，按7.1和7.2操作。

7.4 测定条件

7.4.1 液相色谱参考条件

液相色谱参考条件如下：

a)色谱柱：C₁₈, 5um, 150 mm×2.1 mm(内径)或相当者；

b)色谱柱温度：30℃；

c)进样量：15 uL;

d)流动相梯度及流速见表1。

表1 液相色谱梯度洗脱条件

7.4.2质谱参考条件

质谱参考条件如下：

a)离子化模式：电喷雾正离子模式(ESI+);

b)质谱扫描方式：多反应监测(MRM);

c)鞘气压力：104kPa;

d)辅助气压力：138kPa;

e)正离子模式电喷雾电压((IS),4000V;

f)毛细管温度：320℃；

g)源内诱导解离电压：10V;

h)Q1,Q3分辨率：Q1为0.4,Q3为0.7;

i)碰撞气：高纯氢气；

J)碰撞气压力：0.2Pa;

k)其他质谱参数及7种喹诺酮的CAS号、保留时间见表2。

表2 七种喹诺酮类药物保留时间、CAS号、定性离子对、定量离子对和裂解能量

文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。