CTAB提取缓冲液I：配制1L CTAB提取缓冲液王，应在800mL去离子水中加入46.75g氯化钠，摇动容器使溶质完全溶解，然后加入50mL 1mol／L Tris—HCl(pH 8.0)[在800rnL去离子水中溶解121.1g三羟甲基氨基甲烷(Tris)，冷却至室温后用浓盐酸调节溶液的pH值至8.0(约需42mL浓盐酸)，加水定容至1L，分装后高压灭菌]，20mL 0.5mol／L EDTA(pH 8.0)[在800mL水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2·2H2O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用氢氧化钠(NaOH)调节溶液的pH值至8.0(约需20g氢氧化钠颗粒)然后定容至1L，分装后高压灭菌]，用水定容至1L，分装后高压灭菌。

检测转基因大豆内源基因和外源基因的引物及其信息，用TE缓冲液(pH 8.0)或重蒸水分别将表1 1—14引物稀释到10μmol／L。

CTAB提取缓冲液Ⅱ：配制1L CTAB提取缓冲液Ⅱ，应在800mL去离子水中加入46.75g氯化钠、20g溴代十六烷基三甲胺(CTAB)，摇动容器使溶质完全溶解，然后加入50mL 1mol／L Tris—HCl(pH 8.0)、20m L 0.5mol／L EDTA(pH 8.0)，用水定容至1L，分装后高压灭菌。

乙酸钠溶液：配制lL乙酸钠溶液，应在800mL水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节pH值至5.2，用水定容至1I．，分装后高压灭菌。

RNase A：将10mg胰RNA酶溶解于987μL水中，然后加入1mol／L Tris -HCl(pH 8.0) 10μL在800rnL去离子水中溶解121.1g三羟甲基氨基甲烷(Tris)，加入60rnL浓盐酸，冷却至室温后调节pH值至7.5，加水定容至1L，分装后高压灭菌]，5mol／L氯化钠3μL(在800mL水中溶解292.2g氯化钠，加水定容至1L，分装后高压灭菌)，于100℃水浴中保温15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于一20℃。

PCR产物回收试剂盒，按使用说明操作。

通常实验室仪器设备、高速冷冻离心机(12000r／min)、高速台式离心机(12000r／min)、紫外分光光度计、磁力搅拌器、高压灭菌锅、PCR扩增仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像系统或照相系统、重蒸馏水仪。

将100mg充分粉碎的大豆样品，在液氮中充分研磨成粉末后加400／2L冰上预冷的CTAB提取缓冲液I中。加入500μL 65℃预热的CTAB提取缓冲液Ⅱ，1μL2一巯基乙醇，混匀，65℃保温30～90min，期问不时轻缓颠倒混匀。待冷却至室温后加入5μL RNase A储备溶液，室温下放置30min。加入450μL三氯甲烷+异戊醇，轻缓颠倒混匀溶液12000r/min离心2min至分相。将上清液转移至于净的离心管中，依次加600μL异丙醇及60μL乙酸钠溶液，轻缓颠倒混匀。12000r／min离心10min。弃上清液，加入800μL76％乙醇，12000r／min离心5min，弃上清液后再加入100#L 70％乙醇洗涤沉淀。12000r／min离心5min，弃上清液。除去残留的乙醇，待沉淀干燥后，DNA沉淀溶解于100pL TE缓冲液中-20℃保存备用。