5.4 鉴定

5.4.1 弯曲菌属的鉴定

5.4.1.1 概述

挑取5个(如少于5个则全部挑取)或更多的可疑菌落接种到哥伦比亚血琼脂平板上，微需氧条件下42℃±1℃培养24h～48h,按照5.4.1.1～5.4.1.5进行鉴定，结果符合表1的可疑菌落确定为弯曲菌属。

表1弯曲菌属的鉴定

5.4.1.2 形态观察

挑取可疑菌落进行革兰氏染色，镜检。

5.4.1.3 动力观察

挑取可疑菌落用1mL布氏肉汤悬浮，用相差显微镜观察运动状态。

5.4.1.4 氧化酶试验

用铂/铱接种环或玻璃棒挑取可疑菌落至氧化酶试剂润湿的滤纸上，如果在10s内出现紫红色、紫罗兰或深蓝色为阳性。

5.4.1.5 微需氧条件下25℃±1℃生长试验

挑取可疑菌落，接种到哥伦比亚血琼脂平板上，微需氧条件下25℃±1℃培养44h±4h,观察细菌生长情况。

5.4.1.6 有氧条件下42℃±1℃生长试验

挑取可疑菌落，接种到哥伦比亚血琼脂平板上，有氧条件下42℃±1℃培养44h±4h,观察细菌生长情况。

5.4.2 空肠弯曲菌的鉴定

5.4.2.1 过氧化氢酶试验

挑取菌落，加到干净玻片上的3%过氧化氢溶液中，如果在30s内出现气泡则判定结果为阳性。

5.4.2.2 马尿酸钠水解试验

挑取菌落，加到盛有0.4mL 1%马尿酸钠的试管中制成菌悬液。混合均匀后在36℃±1℃水浴中温育2h或36℃±1℃培养箱中温育4h。沿着试管壁缓缓加入0.2mL茚三酮溶液，不要振荡，在36℃±1℃的水浴或培养箱中再温育10min后判读结果。若出现深紫色则为阳性；若出现淡紫色或没有颜色变化则为阴性。

5.4.2.3 吲哚乙酸酯水解试验

挑取菌落至吲哚乙酸酯纸片上，再滴加一滴灭菌水。如果吲哚乙酸酯水解，则在5min～10min内出现深蓝色；若无颜色变化则表示没有发生水解。空肠弯曲菌的鉴定结果见表2。

表2空肠弯曲菌的鉴定

5.4.2.4 替代试验

对于确定为弯曲菌属的菌落，可使用生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡代替5.4.2.1～5.4.2.3进行鉴定。

5.5 结果报告

综合以上试验结果，报告检样单位中检出或未检出空肠弯曲菌。

相关链接：食品微生物学检验空肠弯曲菌检验（二）

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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