4.2.4 层培养基

加热化层琼脂每100mL顶层琼脂中加10mL组氨酸-生物素溶液(0.5mmol/L)。混匀分在4个烧中,0.103MPa灭菌20min。时化分小试管每2mL,45℃水浴中保温。顶层琼脂和组氨酸-生物素溶液(0.5mmol/L)制如下。

4.2.4.1 层琼脂

琼脂粉3.0g,氯化钠2.5g加蒸馏水500mL,0.103MPa灭菌20min。

4.2.4.2 组氨酸-生物素溶液(0.5mmol/L)(诱变试验用)

D-生物素(相对分子质量244)30.5mg和L-组氨酸(相对分子质量155)19.4mg加蒸馏水至250mL,0.103MPa灭菌20min。

4.2.5 特殊试剂及培养基

4.2.5.1 0.8%氨苄青霉素溶液(鉴定菌株用，无菌配制)

氨苄青霉素40mg用氢氧化钠溶液(0.02mol/L)稀释至5mL,保存4℃冰箱备用。

4.2.5.2 0.1%结晶紫溶液(鉴定菌株用)

100mg结晶紫，溶于无菌水至100mL。

4.2.5.3 L-组氨酸溶液和D-生物素溶液(0.5mmol/L)(鉴定菌株用)

L-组氨酸0.4043g和D-生物素12.2mg分别溶于蒸馏水至100mL,0.103MPa灭菌20min,保存于4℃冰箱备用。

4.2.5.4 0.8%四环素溶液(用于四环素抗性试验和氨苄青霉素-四环素平板)

40mg四环素用盐酸缓冲液(0.02mol/L)稀释至5mL,保存于4℃冰箱。

4.2.5.5 氨苄青霉素平板(用作TA97、TA98、TA100菌株的主平板)和氨苄青霉素-四环素平板(用作TA102菌株的主平板)

每1000 mL由以下成分组成：

四环素仅在使用对四环素有抗性的TA102时加入。各成分均已分别灭菌或无菌制备。

4.2.5.6 组氨酸-生物素平板(组氨酸需要试验用)

每1000 mL中由以下成分组成：

4.2.5.7 二甲亚砜(DMSO)

光谱纯,无菌。

4.2.6 阳性诱变剂的配制

根据所选择的诱变剂的种类和剂量用适当的溶媒配制阳性对照品。

注：培养基成分或试剂除特殊说明外至少应是化学纯，无诱变性。避免重复高温处理,选择适当保存温度和期限。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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