5.4.3 母体观察

每日对动物进行临床观察,包括皮肤、被毛、眼睛、黏膜、呼吸、神经行为、四肢活动等情况,及时记录各种中毒体征,包括发生时间、表现程度和持续时间，发现虚弱或濒死的动物应进行隔离或处死,母体有流产或早产征兆时应及时剖检。
在受孕第0天、给予受试物第1天、给予受试物期间每3天及处死当日称母体体重。若通过饮水途径给予受试物,还应记录饮水量。

5.4.4 受孕母体处死和检查

5.4.4.1 一般检查

于分娩前1天(一般大鼠为孕第20天、家兔为孕第28天)处死母体,剖腹检查亲代受孕情况和胎体发育。迅速取出子宫,称子宫连胎重，以得出妊娠动物的净增重。记录黄体数、早死胎数、晚死胎数、活胎数及着床数。

处死时对所有妊娠动物进行尸体解剖和肉眼检查,保存肉眼发现有改变的脏器，以便于进行组织学检查，同时保存足够对照组的相应脏器以供比较。

5.4.4.2 胎仔外观检查

逐一记录胎仔性别、体重、体长,检查胎仔外观有无异常。外观检查至少包括表1的项目。

表1 致畸试验胎仔外观检查项目

5.4.4.3 胎仔骨骼标本制作和检查

骨骼标本制作方法一:将每窝1/2的活胎放入95%乙醇中固定2周～3周，取出胎仔流水冲洗数分钟后放入10g/L～20g/L的氢氧化钾溶液内(至少5倍于胎仔体积)8h～72h,透明后放入茜素红应用液中染色6h～48h,并轻摇1次/d～2次/d,至头骨染红为宜。再放入透明液A中1d～2d,放入透明液B中2d～3d,待骨骼染红而软组织基本褪色。

骨骼标本制作方法二(剥皮法)：将胎鼠去皮、去内脏及脂肪后，放入茜素红溶液染色，当天摇动玻璃瓶2次～3次,待骨骼染成红色时为止。将胎仔换入透明液A中1d～2d,换入透明液B中2d～3d。待胎鼠骨骼已染红，而软组织的紫红色基本褪去，可换置甘油中。

胎仔骨骼检查:将骨骼标本放入小平皿中，用透射光源,在体视显微镜下作整体观察,然后逐步检查骨骼。测量头顶间骨及后头骨缺损情况,然后检查胸骨的数目、缺失或融合(胸骨骨化中心为5个,剑突1块;骨化不全时首先缺第5胸骨、次为缺第2胸骨)，肋骨通常12对～13对,常见畸形有融合肋、分叉肋、波状肋、短肋、多肋(常见14肋)、缺肋、肋骨中断。脊柱发育和椎体数目(颈椎7个，胸椎12个～13个,腰椎5个～6个，底椎4个,尾椎3个～5个)，有无融合、纵裂等。最后检查四肢骨。

胎仔的骨骼检查项目见表2。

表2 致畸试验胎仔骨骼检查项目

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（二）》

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