A.1 一般规定

标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682-2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验

A.2.1 溶解性试验

A.2.1.1 试剂和材料

A.2.1.1.1 乙醇。

A.2.1.1.2 植物油。

A.2.1.2 分析步骤

室温下称取一定量的样品分别加入到一定量水、乙醇和植物油中，摇动0.5min～5min,观察样品的溶解情况。β-胡萝卜素几乎不溶于水和乙醇[(溶质/溶剂)<(1/10000)],微溶于植物油[(1/100)<(溶质/溶剂)<(1/1000)]。

A.2.2 类胡萝卜素试验

A.2.2.1 试剂和材料

A.2.2.1.1 丙酮。

A.2.2.1.2 5%亚硝酸钠溶液：称取50g亚硝酸钠，加水溶解，稀释并定容至1000mL。

A.2.2.1.3 0.5mol/L硫酸溶液。

A.2.2.2 分析步骤

称取一定量的样品加丙翻溶解，样品的丙酮溶液的颜色在连续清加5%亚硝酸钠溶液和0.5mol/L硫酸溶液后逐渐消失。

A.3 总β-胡萝卜素含量的测定

A.3.1 试剂和材料

A.3.1.1 三氯甲烷。

A.3.1.2 环己烷

A.3.2 仪器和设备

紫外-可见分光光度计。

A.3.3 分析步骤

A.3.3.1 溶液A制备

准确称取0.05g试样，精确至0.0001g,置于100mL容量瓶中，加三氯甲烷10mL溶解试样，用环已烷定容至刻度。取此试样液5.0mL于100mL标色容量瓶中，用环已烷定容至刻度，播匀，即得

A.3.3.2 溶液B制备

取溶液A5.0mL于50mL棕色容量瓶中，用环已烷定容至刻度，摇匀，即得。

A.3.3.3 测定

将溶液B置于1cm比色眼中，以环己烷做空白对照，用紫外-可见分光光度计在455nm±2nm范围内的最大吸收波长处测定吸光度。吸光度应控制在0.3～0.7,否则应调整试样液浓度，再重新测定吸光度。

A.3.4 结果计算

总β-胡萝卜素含量以β-胡萝卜素(C₄₀H₅₆)的质量分数w1计，数值以%表示，按公式(A.1)计算：

式中：

A—实际测定试样液吸光度的数值；

C—被测试样液浓度的数值，单位为克每毫升(g/mL);

2500—β-胡萝卜素在环己烷中的百分吸光系数()。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1.5%。

A.4 吸光度比值的测定

A.4.1 试剂和材料

A.4.1.1 三氯甲烷。

A.4.1.2 环已烷

A.4.2 仪器和设备

紫外-可见分光光度计

A.4.3 分析步骤

A.4.3.1 样品溶液的制备

溶液A制备同A.3.3.1,溶液B制备同A.3.3.2

A.4.3.2 A₄₅₅/A₄₈₃的测定

将溶液B置于1cm比色肌中，以环已烷做空白对照，在波长455nm和波长483mm处分别测定吸光度(A),A₄₅₅/A₄₈₃的比值应在1.14～1.19。

A.4.3.3 A₄₅₅/A₃₄₀的测定

将溶液B和溶液A分别置于1cm比色皿中，以环已烷做空白对照，在波长455nm处测定溶液B的吸光度(A₄₅₅),在波长340nm处测定溶液A的吸光度(A₃₄₀),A₄₅₅/A₃₄₀的比值应不小于0.75。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(二)》

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