A.1 一般规定

本标准除另有规定外，所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，应按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备，实验用水应符合GB/T6682-2008中三级水的规定。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验

A.2.1 溶解性

微溶于水，易溶于乙醇。

A.2.2 红外光谱

试样的溴化钾分散物的红外光谱符合附录B中的标准红外光谱图。

A.3 纽甜含量的测定

A.3.1 试剂和材料

A.3.1.1 乙腈：色谱纯。

A.3.1.2 庚烷磺酸钠：色谱纯。

A.3.1.3 三乙胺：色谱纯。

A.3.1.4 水：GB/T6682-2008中一级水。

A.3.1.5 磷酸。

A.3.1.6 纽甜标准品。

A.3.2 仪器和设备

高效液相色谱仪：配紫外检测器，或其他等效的检测器。

A.3.3 参考色谱条件

A.3.3.1 色谱柱：C18色谱柱，4.6mm(内径)×100mm(长)，粒度5um。或其他等同分离效果的色谱柱和色谱条件。

A.3.3.2 流动相：将3.0g庚烷磺酸钠溶于740mL水中，加入3.8mL三乙胺，用磷酸调整溶液pH至3.5，然后加水稀释至750mL。再加入250mL乙腈，用磷酸调整溶液pH至3.7，过滤后备用。

A.3.3.3 柱温：45℃。

A.3.3.4 流速：1.5mL/min。

A.3.3.5 进样量：20uL。

A.3.3.6 检测波长：210nm。

A.3.4 分析步骤

A.3.4.1 标准溶液的制备

称取适量纽甜标准品，精确至0.0001g，用流动相配制成浓度约为1.0mg/mL的标准溶液。

A.3.4.2 试样溶液的制备

称取适量试样，精确至0.0001g，用流动相配制成浓度约为1.0mg/mL的试样溶液。

A.3.4.3 测定

在A.3.3参考色谱条件下，分别对标准溶液和试样溶液进行色谱分析。记录试样溶液色谱图与标准溶液色谱图中纽甜主峰面积。

A.3.5 结果计算

纽甜含量的质量分数w1按公式(A.1)计算：

式中：

ru——试样溶液色谱图中主峰的峰面积值；

rs——标准溶液色谱图中主峰的峰面积值；

cs——标准溶液的实际浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

cu——试样溶液的实际浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)。

A.4 N-[N-(3,3-二甲基丁基)-α-天门冬氨]-L-苯丙氨酸的测定

A.4.1 试剂和材料

A.4.1.1 乙腈：色谱纯。

A.4.1.2 庚烷磺酸钠：色谱纯。

A.4.1.3 三乙胺：色谱纯。

A.4.1.4 水：GB/T6682-2008中一级水。

A.4.1.5 N-[N-(3,3-二甲基丁基)-α-天门冬氨]-L-苯丙氨酸标准品。

A.4.2 仪器和设备

同A.3.2。

A.4.3 参考色谱条件

同A.3.3。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(三)》

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