A.3.1.6 结果计算

瑞鲍迪苷A含量(以干基计)的质量分数w_a按式(A.1)计算：

式中：

m_R——瑞鲍迪苷A标准溶液中瑞鲍迪苷A的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)

m——试样溶液中试样的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)；

A_a——试样溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值；

A_R——瑞鲍迪苷A标准溶液色谱图中瑞鲍迪苷A的峰面积值。

其他8种糖苷含量(以干基计)的质量分数w_i按式(A.2)计算：

式中：

i——s、b、c、d、f、da、ru、sb，分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷；

m_s——甜菊苷标准溶液中甜菊苷的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)；

m——-试样溶液中试样的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)；

f_i——i组分与甜菊苷的式量比值：1.00(甜菊苷)、1.00(瑞鲍迪苷B)、1.18(瑞鲍迪苷C)、1.40(瑞鲍迪苷D、1.16(瑞鲍迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊双糖苷)；

A_i——试样溶液色谱图中i组分的峰面积值；

A_s——甜菊苷标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积值。

由式(A.1)和式(A.2)计算得到9种组分的含量w_a、w_s、w_b、w_c、w_d、w_f、w_da、w_ru和w_sb，取各组分含量之和即为试样中甜菊糖苷含量。

A.3.2 方法二

A.3.2.1 试剂和材料

A.3.2.1.1 乙腈：色谱纯。

A.3.2.1.2 磷酸二氢钠：色谱纯。

A.3.2.1.3 磷酸：色谱纯。

A.3.2.1.4 水：GB/T6682-2008中规定的一级水。

A.3.2.1.5 乙腈水溶液：乙腈和水的体积比为30∶70。

A.3.2.1.6 磷酸钠缓冲液(pH2.6)：称取1.20g磷酸二氢钠(NaH₂PO₄)，溶于800mL水中，用磷酸调节pH至2.6，用水稀释至1000mL。

A.3.2.1.7 甜菊苷标准品：甜菊苷含量(质量分数，以干基计)≥99.0%。

A.3.2.1.8 其他8种糖苷标准品：瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷和甜菊双糖苷。

A.3.2.2 仪器和设备

同A.3.1.2。

A.3.2.3 参考色谱条件

同A.3.1.3。

A.3.2.4 分析步骤

A.3.2.4.1 混合标准品溶液的制备

分别称取适量甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷标准品，置于同一个容量瓶中，用乙腈水溶液完全溶解后定容，得到混合标准品溶液。混合标准品溶液用于确定9种糖苷的相对保留时间.

A.3.2.4.2 标准溶液的制备

称取0.05g甜菊苷标准品，精确至0.001g，置于50mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度，得到甜菊苷标准溶液。

A.3.2.4.3 试样溶液的制备

称取0.05g～0.1g试样，精确至0.001g，置于50mL的容量瓶中，用乙腈水溶液溶解后稀释至刻度，得到试样溶液。

A.3.2.5 测定

在A.3.2.3参考色谱条件下，分别对混合标准品溶液、标准溶液和试样溶液进行色谱分析。将试样溶液的色谱图与混合标准品溶液的色谱图相比较，以确定试样溶液色谱图中各组分对应的峰。记录试样溶液色谱图中甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷的峰面积及标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积。

A.3.2.6 结果计算

9种糖苷含量(以干基计)的质量分数w_i按式(A.3)计算：

式中：

i——s、a、b、c、d、f、da、ru、sb，分别对应甜菊苷、瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷B、瑞鲍迪苷C、瑞鲍迪苷D、瑞鲍迪苷F、杜克苷A、甜茶苷、甜菊双糖苷；

m_s——甜菊苷标准溶液中甜菊苷的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)；

m——试样溶液中试样的质量(以干基计)，单位为毫克(mg)；

f_i——i组分与甜菊苷的式量比值：1.00(甜菊苷)、1.20(瑞鲍迪苷A)、1.00(瑞迪苷B)、1.18(瑞鲍迪苷C)、1.40(瑞鲍迪苷D)、1.16(瑞鲍迪苷F)、0.98(杜克苷A)、0.80(甜茶苷)、0.80(甜菊双糖苷)；

A_i——试样溶液色谱图中i组分的峰面积值；

A_s——甜菊苷标准溶液色谱图中甜菊苷的峰面积值。

由式(A.3)计算得到9种组分的含量w_s、w_a、w_b、w_c、w_d、w_f、w_da、w_ru和w_sb，取各组分含量之和即为试样中甜菊糖苷含量。

相关链接：食品添加剂甜菊糖苷检验方法（一）

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(四)》

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